[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以 下引物序列：

ORF3-F5’-gcgcgttttgctgtcat-3’（SEQID1），

ORF3-R5’-gtcaccaccttctaaaatcac-3’（SEQID2）；

S-P15’-gaaaaccagggtgtcaat-3’（SEQID3），

S-P25’-cagcaagaatgacagaggtg-3’（SEQID4）。

2.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所 述的引物ORF3-F、ORF3-R扩增PEDV的ORF3基因片段。

3.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所 述试剂盒包括以下组分：RT-PCR反应缓冲液、反转录酶、聚合酶。

4.根据权利要求3所述的猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所 述的RT-PCR反应缓冲液包括RNA模板14μL，5×PrimeScriptTM缓冲液4μL，RTEnzyme Mix1.0μL，反转录引物Oligo18T1.0μL。

5.根据权利要求3所述的猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所 述的RT-PCR反应条件为：95℃预变性3min；94℃变性40s，52℃复性40s，72℃延伸50s， 40个循环；最后72℃延伸8min。

6.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒在检测猪流行性 腹泻病毒变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株的应用。

7.根据权利要求6所述的猪流行性腹泻病毒的多重RT-PCR检测试剂盒的应用，其特征 在于，所述的引物ORF3-F、ORF3-R扩增变异毒株和经典毒株预期目的片段大小为234bp，弱 毒疫苗株预期目的片段大小为185bp。