[发明专利]一种菌渣培养促中国被毛孢产分生孢子的方法有效
申请号: | 201610196300.0 | 申请日: | 2016-03-31 |
公开(公告)号: | CN105695390B | 公开(公告)日: | 2017-12-05 |
发明(设计)人: | 李文佳;张宗耀;李全平;吕延华;何俊 | 申请(专利权)人: | 广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司 |
主分类号: | C12N3/00 | 分类号: | C12N3/00;C12R1/645 |
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地址: | 523808 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 培养 中国 被毛孢产 分生孢子 方法 | ||
1.一种菌渣培养促中国被毛孢产分生孢子的方法,其特征在于,包括以下制备步骤:
(1)菌种选择:收集冬虫夏草子囊孢子,挑取单子囊孢子进行培养,得到中国被毛孢单子囊孢子菌落;
(2)菌渣获得:在菌落中挑取3-5块菌块接种于培养基中,将菌块打碎,于恒温摇床中培养10天,记为一级摇瓶;将一级摇瓶进行扩培,在相同培养条件下培养5天,记为二级摇瓶;将二级摇瓶进行扩培,在相同培养条件下培养5天,记为三级摇瓶;将获得的三级摇瓶进行菌液分离,获得的菌丝体即为菌渣;
(3)菌渣生长:将菌渣分装于无菌广口瓶中,底部垫上吸水棉,封好瓶盖,放置于恒温培养箱中培养生长;所述菌渣生长阶段的温度为15-20℃;所述菌渣生长阶段的湿度为60-80%;所述菌渣的生长时间为15-25天;
(4)分生孢子诱导:待菌渣表面布满气生菌丝后,在一定温湿度下光周期刺激培养进行分生孢子诱导,诱导一定时间后得到大量散落的分生孢子;分生孢子诱导阶段的温度为5-10℃;分生孢子诱导阶段的湿度为70-90%;分生孢子的诱导时间为10-20天;
所述光周期刺激培养为光照培养12小时,黑暗培养12小时;其中,光照的光源选自蓝光、红光、或蓝光与红光的组合。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述菌块打碎后在摇床中的培养条件为:在120rpm下,20℃恒温培养。
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