[发明专利]一种减少荧光衰减的封片剂

说明书

本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”，其特征是所述的减少荧光衰减的封片剂中包括如下组分：聚乙烯醇、甘油、重氮双环辛烷、金属离子螯合剂、碳酸盐缓冲液、Tris‑HCl缓冲液、防腐剂、水，既能用于自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本的封片以延缓样本荧光的衰减程度，亦可用于常规染色后的封片。本发明还提供了所述的减少荧光衰减的封片剂的制备方法及封片方法，大大减缓各种荧光衰减或淬灭的程度，较普通抗荧光淬灭封片剂的抗淬灭效果大大增强。

技术领域：

本发明属于生物医药应用领域，具体涉及一种减缓荧光衰减或淬灭的封片剂及其制备、封片方法。

背景技术：

封片是将组织切片(亦可是血液涂片、细胞爬片等)封固保存于载玻片与盖玻片之间，使之不与空气发生接触，防止其氧化、褪色，利于镜检观察及保存。对于组织切片，完成染色后经过脱水透明后，为了易于在显微镜下观察，并能长时间保存备查，需要用封片剂(又称封固剂、封片介质等)把染片封固起来，从而完成一张组织玻片标本的制作。一般情况下，较好的封片剂具有如下特点：1、牢固的黏性；2、较好的折光性；3、折光率与玻片差距不大；4、能与透明剂相混合；5、中性，对染料无影响等。

目前，市面上常用的封片剂有两大类：1、非水溶性胶：主要用于染色后经无水乙醇脱水，二甲苯透明的染色片的封片。常用的有中性树胶、加拿大树胶、DPX合成树脂等。2、水溶性胶：主要用于染色后不能经无水乙醇脱水，二甲苯透明的染色片的封固。常用的水溶性胶有甘油明胶、阿拉伯糖胶以及进口的专用水溶性胶等。

在生物学应用领域，经常需要用荧光染料对组织、细胞等样本进行荧光染色，在荧光显微镜下进行观察。荧光显微镜与普通光学显微镜不同，它不是通过普通光源的照明观察样本，而是利用一定波长的光(通常是紫外光、蓝紫光)激发显微镜下标本内的荧光物质，使之发射荧光，所以荧光显微镜的光源所起的作用不是直接照明，而是作为一种激发标本的内荧光物质的能源。科研工作者之所以能观察样本，不是由于光源的照明，而是标本内荧光物质吸收激发的光能后呈现的荧光现象。

由于荧光容易褪色，样本作荧光染色后最好立即在荧光显微镜下观察，当时的荧光强度是最强的。但由于种种原因，样本染色后不能及时观察，需要用特殊介质保存，以避免荧光减退。因此开发出一种减缓荧光衰减或淬灭的封片剂就显得尤其重要。

发明内容：

为了解决自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本的荧光易衰减或淬灭的问题，本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”旨在提供一种减少荧光衰退的水溶性封片剂，能够保存自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本，大大延缓样本荧光的衰减程度，可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭，较普通抗荧光淬灭封片剂的抗淬灭效果大大增强，一般3周后特异性荧光的强度才会有所减弱。

一种减少荧光衰减的封片剂，其特征是所述的每100ml封片剂中包括如下组分：聚乙烯醇0.1～6g；甘油8～30ml；重氮双环辛烷1.5～5g；金属离子螯合剂0.05～1g；碳酸盐缓冲液15～40ml；Tris-HCl缓冲液15～30ml；防腐剂0.02g～1g；其余为水。

进一步地，所述的聚乙烯醇与所述的重氮双环辛烷的质量比小于1.5。

进一步地，所述的碳酸盐缓冲液与所述的Tris-HCl缓冲液的体积比大于1。