[发明专利]一种用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法

说明书

本发明涉及医疗用品制造领域，尤其是一种用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法，解决了目前用于治疗糖尿病足溃疡的生物敷料疗效有效的技术问题，本技术方案包括活性层凝胶和保护层凝胶，活性层凝胶的制备；保护层凝胶的制备；将活性层凝胶和保护层凝胶复合并进行低温冷冻干燥，形成凝胶海绵，密封包装后灭菌制备完成。本发明制备的活性凝胶海绵具有普通敷料的创面保护特性，也具有强大的血管再生与组织修复能力，并且这种复合的生长因子与细胞外基质蛋白相较于单一的生长因子治疗而言更具有血管再生与创面修复能力，该活性敷料采用冻干的形式，更利于维持凝胶中大量生长因子以及活性蛋白的活性，并且能在室温条件下存放和运输。

技术领域

本发明涉及医疗用品制造技术领域，尤其是一种用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法。

背景技术

糖尿病足溃疡与坏疽是糖尿病的严重并发症及糖尿病患者致死致残的重要原因之一。中国9240万糖尿病患者中近乎10％的糖尿病患者有足溃疡并发症，15％以上在患病过程中会发生足溃疡或坏疽，14％-24％的糖尿病足溃疡患者需要截肢，在非外伤性下肢截肢患者中，糖尿病足溃疡患者所占比例超过一半，不管截肢与否，糖尿病足溃疡患者的死亡率为29％，IV级以上合并细菌感染而未行手术治疗的严重患者死亡率高达54％。

糖尿病足部溃疡发生发展主要是因为下肢神经病变与动脉血管病变引起的。该病变是由于糖尿病患者体内含有高浓度的糖基化终末产物，糖基化终末产物能直接抑制神经传导，损伤神经细胞和血管内皮细胞。此外高浓度的AGE可以与细胞表面的受体结合，启动多个信号通路，对细胞形态和功能造成损害。另外长期持续的高血糖也可引起胶原纤维糖基化，造成关节囊结构和韧带结构僵硬、使踝关节等活动减低，增加足跖部压力而发生溃疡。

现有治疗糖尿病足溃疡的方法有血管形成术、生物敷料治疗、高压氧治疗、细胞因子治疗、细胞治疗等方法。其中生物敷料的使用是目前治疗糖尿病足溃疡所必须采用的方法，因为保持一个湿润清洁的创面环境可以防止组织失水、细胞坏死、有利于血管的生成。而随着技术的进步，含有生长因子的新型生物活性敷料被开发出来治疗糖尿病足溃疡，生长因子在创面的修复过程中发挥着非常重要的作用，它参与整个创面的修复再生。糖尿病足溃疡经久不愈的一个主要原因就是因为内源性生长因子释放的减少，组织再生修复能力下降。重组人血小板生长因子、表皮细胞生长因子在临床的使用上已经证明了其能显著促进创面愈合。但是，其疗效由于个体与病情的差异不是很稳定，并且创面的修复再生是一个复杂的过程，需要多种生长因子与细胞活性蛋白协同作用，因此单一生长因子的使用其疗效有限。

干细胞是一种具有自我更新与分化潜能的细胞，具有强大的组织再生修复能力，间充质干细胞是一种取材方便，不被异体免疫排斥，具有多向分化潜能的干细胞。间充质干细胞已经被证明对缺血性心肌、骨组织具有再生修复作用，在治疗难愈性创面的研究中也多有报道。大量的研究显示间充质干细胞主要依靠的是其强大的旁分泌能力实现血管再生修复的，如血管内皮细胞生长因子的释放。间充质干细胞可从不同的组织分离、纯化而来，如骨髓来源、脂肪来源、口腔来源、胚胎来源，其中胚胎来源的间充质干细胞相较于其它来源的间充质干细胞具有最强的因子分泌能力。因此脐带间充质干细胞用于糖尿病足溃疡的治疗非常具有应用前景，但是直接使用活性细胞，具有活性难以维持、运输困难、货架期短等一系列困难，不易推广使用。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述技术的不足而提供一种用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法，通过复合脐带间充质干细胞，使活性凝胶海绵包含大量脐带间充质干细胞分泌的生长因子与细胞外基质等活性蛋白，并通过冻干的方式长期维持蛋白的活性。

为了达到上述目的，本发明所设计的用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法，它包括活性层凝胶和保护层凝胶，