[发明专利]一种流行性出血热病毒检测试剂盒

权利要求书

1.一种流行性出血热病毒检测试剂盒，其特征在于，包括纳米金标记的鼠 抗人IgA抗体检测探针、流行性出血热病毒混合特异性抗原、斑点金免疫集中 渗滤装置，所述的集中渗滤装置由塑料小盒、点加了流行性出血热病毒混合特 异性抗原的硝酸纤维素膜和吸水垫三部分组成，所述塑料小盒底部中央有一个 与盒盖上的方孔相对应相对应的方形凹槽。

2.如权利要求1所述的一种流行性出血热病毒检测试剂盒，其特征在于， 所述流行性出血热病毒混合特异性抗原是由家鼠型特异性抗原、野鼠型特异性 抗原和中间型特异性抗原的混合。

3.如权利要求1～2任一项所述的一种流行性出血热病毒检测试剂盒，其 特征在于：所述点加了流行性出血热病毒混合特异性抗原的硝酸纤维素膜采用 如下方法制备得到：

将流行性出血热病毒混合特异性抗原用稀释液调节浓度至1.72～ 1.95μg/mL，即得抗原浓缩液，-20～-4℃保存；将硝酸纤维素膜上放入调节好 浓度的流行性出血热病毒混合特异性抗原溶液中，静置20～30min，待硝酸纤 维素膜充分吸附流行性出血热病毒混合特异性抗原，取出，低温保存备用。

4.如权利要求1～3任一项所述的一种流行性出血热病毒检测试剂盒，其 特征在于，所述的纳米金标记的鼠抗人IgA抗体检测探针的制备方法包括如下 步骤：

(1)制备纳米金溶液：用王水(体积比为3:1的浓HCL和浓HNO3)浸泡 容器一定时间，然后用超纯水清洗干净，烘干；向容器内加入99.14mL纯水和 0.86mL的2％氯金酸溶液，边搅拌边加热，加热至沸腾后继续煮沸8min，加入 2.5mL1％柠檬酸三钠水溶液，继续搅拌加热10min，冷却后加入纯水至100mL， 得到酒红色纳米金溶液；

(2)制备纳米金标记的鼠抗人IgA抗体检测探针:

a、调节胶体金溶液pH:取上述制备的胶体金溶液，用K₂CO₃溶液调节pH至 7.5～8.0；

b、稀释流行性出血热病毒混合特异性抗原：用磷酸盐缓冲液(PB)将流行 性出血热病毒混合特异性抗原稀释至蛋白含量为0.74～0.86mg/mL；

c、纳米金标记：取步骤b中的稀释液，在4℃条件下3000r/min离心22～ 25min，吸取上清液，弃去沉淀，边搅拌边将上清液逐滴加入到步骤a中调节好 pH的胶体金溶液中，充分混匀结合，静置；加入与前述混合液等体积的稳定剂， 在4℃条件下3000r/min离心24min，静置,弃上清，留沉淀物，用缓释剂重悬， 即得到纳米金标记的鼠抗人IgA抗体检测探针。

5.如权利要求1所述的一种流行性出血热病毒检测试剂盒，其特征在于， 其制备方法为：将吸水垫放置于所述塑料小盒的底部中央的凹槽处，将硝酸纤 维素膜放在吸水垫与盒盖之间，紧密关闭盒盖，使硝酸纤维素膜贴紧吸水垫。