[发明专利]一种高灵敏检测黄曲霉毒素的方法及其应用

权利要求书

1.一种高灵敏检测黄曲霉毒素的方法及其应用，其特征在于该方法包括以下步骤：

（1）工作曲线的制作

配制黄曲霉毒素B1及黄曲霉毒素G1混合标准溶液0.5～200ng/mL，加入一定量的衍生试剂，在紫外灯下照射一定时间进行衍生反应，在选定色谱条件下进高效液相色谱进行测定，得到黄曲霉毒素回归方程、相关系数、相对标准偏差、回收率；

（2）样品提取

对于大米、玉米、小麦、花生、核桃、杏仁及其制品及中药提取方法为：准确称取粉碎均质后的样品2～5g，精确至0.0001g，加入体积分数为70～80%的乙腈水溶液20～50 mL，剧烈振荡 1 min，50±2℃水浴超声提取20～30 min，以 3500～5000r/min 离心 5～10 min，取出上层溶液，重复提取2～3次，合并上清液，待用；

对于酱油、食醋、植物油脂提取方法为：准确称取5.00～10.00g样品，加入2～5 gNaCl和体积分数为70～80%的乙腈水溶液20～50 mL，涡旋混合1～3min，定量滤纸过滤，准确吸取 5.00 mL 滤液，加入10mL 超纯水稀释，混匀，待用；

（3）样品测定

取步骤（2）中的提取液，按照步骤（1）进行荧光衍生，在与步骤（1）相同色谱条件进行HPLC分析，并对照步骤（1）所得的线性回归方程，计算样品中黄曲霉毒素的含量；

食品样品中待测黄曲霉毒素包括：黄曲霉毒素 B1、G1；衍生试剂为三氟乙酸。

2.根据权利要求1所述的一种高灵敏检测黄曲霉毒素的方法及其应用， 其特征在于步骤（1）所述衍生试剂体积百分比浓度为15～25%，所述的紫外灯下照射时间为5～20min。

3.根据权利要求1所述的一种高灵敏检测黄曲霉毒素的方法及其应用， 其特征在于设定的液相色谱条件为：4.6 mm×250 mm，5.0 μm 的C18色谱柱，流动相甲醇-水45∶55，流速1.0 mL/min，进样量50 μL，柱温箱30℃。

4.根据权利要求1所述的一种高灵敏检测黄曲霉毒素的方法及其应用， 其特征在于检测器为荧光检测器，激发波长 360 nm，发射波长 440 nm；配备荧光检测器的高效液相色谱仪。