[发明专利]一种生产含高硒蛋白红球藻的方法、检测方法及其应用

权利要求书

1.一种生产含高硒蛋白红球藻的方法，其特征在于，所述的方法包括如下步骤：

1.1将雨生红球藻在培养基中培养，培养温度为22±0.5℃，光强20 μmolm^-2s^-1；所述的培养基组成如下：NaNO₃：0.2g/L，K₂HPO₄： 0.02g/L，MgSO₄·7H₂O：0.02g/L，土壤提取液：30mL/L，EDTA： 0.004g/L,FeSO₄·7H₂O：0.0035g/L，ZnSO₄·7H₂O：5×10^-6g/L， MnSO₄·4H₂O：1×10^-5g/L，H₃BO₃：5×10^-5g/L，CuSO₄·5H₂O： 2.5×10^-8g/L，Co(NO₃)₂·6H₂O：5×10^-6g/L，蛋白胨1g/L，亚硒 酸钠：0-3mg/L，pH为7-8.5；

1.2诱导红球藻产生高硒蛋白，其方法是向培养体系添加亚硒酸钠，使培 养体系中亚硒酸钠的终浓度为3mg/L-33mg/L；

1.3培养5-15天，每天上午下午各摇一次；

1.4收集培养后的含高硒蛋白红球藻。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1.2中亚硒酸钠的终浓度为13 mg/L。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1.2中于培养的第一天向培养 基中加入亚硒酸钠。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1.2中于培养期间向培养基内 添加一次以上的亚硒酸钠。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1.3中培养的时间为14天。

6.一种在红球藻中检测有机硒的方法，其特征在于，所述的检测方法包括如下 步骤：

6.1离心收集培养后的雨生红球藻，60℃烘箱干燥24h，称取样品，分别 加入ddH₂O中，加热至近沸，保持8-12min，冷却后，转入容量瓶 中定容，摇匀，干过滤，取滤液，加入环己烷萃取后，水相转入离心 管，测定水相中无机硒含量；

6.2再称取和上一步骤中同样重量的样品，放入消解罐内，再加入95％ 浓硝酸和20％过氧化氢溶液消解，将消解后的样品倒入烧杯内，保持 近沸除去多余的硝酸，ddH₂O定容后，测定总硒含量，其中95％浓硝 酸和20％过氧化氢溶液，按3:1的比例混合；

6.3计算：有机硒的含量＝总硒含量－无机硒含量。

7.如权利要求1-5任一权利要求所述的含高硒蛋白红球藻在制备食品中的应用。

8.如权利要求1-5任一权利要求所述的含高硒蛋白红球藻在制备保健品中的应 用。

9.如权利要求1-5任一权利要求所述的含高硒蛋白红球藻在制备药品中的应用。