[发明专利]一种生产含高硒蛋白红球藻的方法、检测方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于水生生物学与生物技术领域，具体来讲涉及一种利用无机硒促 进雨生红球藻富集硒蛋白的方法。

背景技术

硒是一种人体必需的微量营养元素，常以氧化态Se(Ⅱ)、Se(Ⅳ)、Se(Ⅵ)形 式存在，并为许多重要的细胞与生命活动提供支持。缺硒会导致一些重要的生 理过程失调，从而导致心脏病、神经肌肉失调、癌症与炎症以及不育，硒同时 也被认为与动物发育、免疫功能、抑制病毒等有密切关系，对人体健康有益的 硒每日建议摄入量为50-200微克。中国大陆部分地区土壤含硒量低，使得居民 无法补充足够的硒而影响健康，我国13个省市的营养调查表明，成人每日硒摄 入量仅不到27微克，相对于过量的无机硒对生物体具有一定毒性，在我国补硒 提倡采用安全性更高的有机硒强化剂。

有机硒主要包括硒蛋白、富硒酵母和硒化卡拉胶等，硒元素化学性质类似 硫元素，因此许多含硫氨基酸能被硒替代而形成含硒氨基酸，如甲硫氨酸、半 胱氨酸和胱氨酸。其中，硒代半胱氨酸(Sec)是一种具有重要生物活性的氨基 酸，被称为“第21种氨基酸”，而硒蛋白是一种含有至少一个硒代半胱氨酸的 蛋白质，在细胞内主要担任抗氧化酶的作用，因此，硒蛋白具有安全性高，易 吸收且利用率高，是补充硒元素的最佳途径。

目前市场上主要的富硒产品中，富硒蔬菜对硒的吸收富集能力有限，且受 土壤等环境因素影响，富硒酵母与植物相似，所富集的有机硒主要以硒代甲硫 氨酸为主。傅瑞娟(2010)报道的实验表明：对组织中多种抗氧化酶的影响， 硒代半胱氨酸的作用效果优于富硒酵母。因此，相对于普通的有机硒，含硒代 半胱氨酸的硒蛋白作为硒强化剂对于提高机体抗氧化能力有更好的效果。

发明内容

本发明的目的在于提供一种有机硒的制备方法，将亚硒酸钠添加到雨生红 球藻的培养体系中，使整个培养体系中亚硒酸钠的浓度控制在0.01-23.0mg/L的 范围内。为实现这个目的，本发明采用的方法如下：

一种生产含高硒蛋白红球藻的方法，所述的方法包括如下步骤：

1.1将雨生红球藻在培养基中培养，培养温度为22±0.5℃，光强20 μmolm^-2s^-1；雨生红球藻的生长分为接种阶段、营养生长阶段、细胞 类型转化阶段和藻细胞虾青素累积阶段；

所述的培养基的组成如下：NaNO₃：0.2g/L，K₂HPO₄：0.02g/L，MgSO₄·7H₂O：0.02g/L，土壤提取液：30mL/L，EDTA：0.004g/L,FeSO₄·7H₂O：0.0035g/L，ZnSO₄·7H₂O：5×10^-6g/L，MnSO₄·4H₂O：1×10^-5g/L，H₃BO₃：5×10^-5g/L，CuSO₄·5H₂O：2.5×10^-8g/L，Co(NO₃)₂·6H₂O：5×10^-6g/L，蛋白胨1g/L，pH为7-8.5。可添加亚硒酸钠使整个体系中亚硒酸钠的浓度控制在0.01-3mg/L，亦可不添加亚硒酸钠,制备培养基时添加适量的亚硒酸钠可以用于促进藻细胞的生长；