[发明专利]一种脂必妥片中桔霉素的检测方法

权利要求书

1.一种脂必妥片中桔霉素的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括下述步骤：1)制备标准溶液；2)取脂必妥片0.5g粉碎，置10ml锥形瓶中，加3ml 1％磷酸-甲醇溶液，60℃加热回流60min，冷却，过滤，滤液转移至25ml容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀后过滤，以1ml/min流速通过分别以3ml乙醇和3ml水活化的HLB固相萃取柱，用5ml水淋洗，弃去，再用5ml乙醇洗脱收集洗脱液，洗脱液于40℃下氮吹至近干，精密加入1ml乙醇溶解，用0.22μm有机滤膜过滤，即得待测样品，将待测样品上Agilent1295-6550C三重四级杆液相质谱联用仪检测；

所述的液相色谱与质谱条件色谱柱：Agilent poroshell 120 EC-C18，3.0×50mm 2.7micron，1.8μm；流动相A为0.2％磷酸，流动相B为甲醇，采用梯度洗脱程序如下：0-3min，A、75-5％，B、25-95％；3-5.5min，A、5％，B、95％；5.5.-5.6min，A、75％，B、25％；流速0.2ml/min；柱温40℃；进样量2μl；电喷雾源ESI，正离子方式，选择多反应监测MRM，载气温度：150℃，载气流量：15L/min，雾化器压力40psi，鞘气温度300℃，鞘气流量：12L/min，毛细管电压3500V，定性定量离子：母离子m/z＝251.2，子离子m/z233.2和m/z 205.2，碰撞能量分别为5V和20V。

2.根据权利要求1所述的一种脂必妥片中桔霉素的检测方法，其特征在于，所述的制备标准溶液包括下述步骤：

1)标准溶液的制备

标准储备液：精密称取标准物质5mg，置5ml容量瓶中，加乙醇溶解并至刻度，使成浓度为1mg/ml；

标准稀释液：精密吸取标准溶液0.2ml，置50ml的容量瓶中，加乙醇稀释至刻度，使成浓度为2μg/ml1；

标准工作曲线：取标准稀释液液适量加乙醇，分别配制成浓度为0.01、2、5、5、20ng/ml标准工作液。