[发明专利]结肠癌细胞的体外拟组织化培养方法在审

专利信息
申请号: 201610235756.3 申请日: 2016-04-15
公开(公告)号: CN105754948A 公开(公告)日: 2016-07-13
发明(设计)人: 郑晓冬;徐冬冬 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N5/09 分类号: C12N5/09
代理公司: 杭州中成专利事务所有限公司 33212 代理人: 金祺
地址: 310058 浙江*** 国省代码: 浙江;33
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 结肠 癌细胞 体外 组织 培养 方法
【权利要求书】:

1.结肠癌细胞的体外拟组织化培养方法,其特征是依次进行如下步骤:

1)、中空纤维的灭菌:

将中空纤维切成2~4cm长的小段,浸泡于PBS缓冲溶液中,然后一同置于蒸汽高压灭菌锅灭菌20min;

待灭菌完毕,在超净台中取出中空纤维置于平皿上铺开风干;

2)、中空纤维预先铺被胶原:

首先将I型鼠尾胶原稀释配制成浓度为0.7~0.8mg/mL鼠尾胶原溶液,然后将上述鼠尾胶原溶液注满平躺状态下的步骤1)所得的灭菌后中空纤维的内腔;接着静置20~40min;

3)、将Caco-2细胞悬液计数后稀释到5×106cells/mL注入至步骤2)所得的中空纤维内腔,直至该中空纤维内腔充满Caco-2细胞悬液,置于37±0.2℃培养箱中,使用驱动装置使中空纤维沿轴向旋转,转速为转90度/小时,旋转时间为4h;

4)、旋转4h后,将培养有细胞的中空纤维置于培养板中,在培养板的每孔加入2~3mL培养基,将培养板放入37±0.2℃培养箱中进行培养;每1~2天更换一次培养基。

2.根据权利要求1所述的结肠癌细胞的体外拟组织化培养方法,其特征是:

所述步骤4)中,培养板的每孔中设置2~3根中空纤维。

3.根据权利要求1或2所述的结肠癌细胞的体外拟组织化培养方法,其特征是:所述中空纤维为PES中空纤维膜或PVDF中空纤维膜;

所述PES中空纤维膜为:孔径0.1μm,0.1MPa下纯水通量1000L/m2h,内/外径0.8/1.4mm;

所述PVDF中空纤维膜为:孔径0.2μm,0.1MPa下纯水通量800L/m2h,内/外径0.7/1.3mm。

4.根据权利要求3所述的结肠癌细胞的体外拟组织化培养方法,其特征是:

所述步骤3)中使用步进电机驱动装置使中空纤维沿轴向旋转。

5.根据权利要求3所述的结肠癌细胞的体外拟组织化培养方法,其特征是:

所述步骤4)中的培养基为:将DMEM基础培养基(高糖)与胎牛血清按照9:1的体积比混合,得培养基。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江大学,未经浙江大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201610235756.3/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top