[发明专利]一种造血干细胞体外扩增培养的无血清培养基及其应用

权利要求书

1.一种用于培养细胞的无血清培养基，所述培养基包括重组人胰岛素、重组人 转铁蛋白、重组人血白蛋白、β-巯基乙醇、乙醇胺、胆固醇、亚油酸和油酸。

2.根据权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于：

所述重组人胰岛素、所述重组人转铁蛋白、所述重组人血白蛋白、所述β-巯基乙 醇、所述乙醇胺、所述胆固醇、所述亚油酸和所述油酸的质量比为5-30：20-80：50-300： 10-100：1-10：1-10：0.1-5：1.5。

3.根据权利要求1或2所述的无血清培养基，其特征在于：所述重组人胰岛素、 所述重组人转铁蛋白、所述重组人血白蛋白、所述β-巯基乙醇、所述乙醇胺、所述胆 固醇、所述亚油酸和所述油酸的质量比为10:50:100:40:5:5:1:1.5。

4.根据权利要求1-3中任一所述的无血清培养基，其特征在于：

所述培养基还包括基础培养基、L-谷氨酰胺、干细胞因子、白细胞介素3、白细 胞介素6、血小板生成素、促红细胞生成素、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和粒细胞 集落刺激因子；

所述L-谷氨酰胺在细胞临培养前加入；

所述干细胞因子、所述白细胞介素3、所述白细胞介素6、所述血小板生成素、 所述促红细胞生成素、所述粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和所述粒细胞集落刺激因子 均在细胞培养的过程中加入。

5.根据权利要求1-4中任一所述的无血清培养基，其特征在于：

所述培养基的pH为6.8-7.2；

所述基础培养基为细胞基础培养基；所述细胞基础培养基具体为IMDM基础培养 基。

6.根据权利要求1-5中任一所述的无血清培养基，其特征在于：

所述重组人胰岛素在所述无血清培养基中的浓度为5-30mg/L；

所述重组人转铁蛋白在所述无血清培养基中的浓度为20-80mg/L；

所述重组人血白蛋白在所述无血清培养基中的浓度为50-300mg/L

所述β-巯基乙醇在所述无血清培养基中的浓度为10-100mg/L；

所述乙醇胺在所述无血清培养基中的浓度为1-10mg/L；

所述胆固醇在所述无血清培养基中的浓度为1-10mg/L；

所述亚油酸在所述无血清培养基中的浓度为0.1-5mg/L；

所述油酸在所述无血清培养基中的浓度为0.1-5mg/L；

所述L-谷氨酰胺在所述无血清培养基中的浓度为100-800mg/L

所述干细胞因子在所述无血清培养基中的浓度为10-100ng/mL；

所述白细胞介素3在所述无血清培养基中的浓度为10-100ng/mL；

所述白细胞介素6在所述无血清培养基中的浓度为10-100ng/mL；

所述血小板生成素在所述无血清培养基中的浓度为1-10U/ml；

所述促红细胞生成素在所述无血清培养基中的浓度为1-10U/ml；

所述粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在所述无血清培养基中的浓度为10-50ng/ml；

所述粒细胞集落刺激因子在所述无血清培养基中的浓度为10-50ng/ml。