[发明专利]采用UIO‑66‑NH2材料测定血清中唾液酸含量的方法

权利要求书

1.一种采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)制备血清处理液：采用三氟乙酸将血清样品水解，除去蛋白质后离心得到血清处理液；

(2)分散固相萃取：将步骤(1)所得血清处理液与UIO-66-NH₂材料混合，经漩涡振荡萃取，血清处理液中的唾液酸被萃取到UIO-66-NH₂材料中，离心后得到含有唾液酸的UIO-66-NH₂材料；

(3)超声洗脱：采用乙酸水溶液超声洗脱步骤(2)离心后得到的含有唾液酸的UIO-66-NH₂材料，唾液酸从UIO-66-NH₂材料中完全洗脱得到洗脱液；

(4)衍生处理、色谱检测：将洗脱液通过荧光衍生试剂进行柱前衍生，最后进行高效液相色谱检测。

2.根据权利要求1所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(2)中UIO-66-NH₂材料的制备方法如下：

先将四氯化锆、2-氨基对苯二甲酸和水混合，加入N,N-二甲基甲酰胺后，搅拌至形成透明溶液，加热后在静止状态下进行结晶，结晶完毕后经冷却、过滤、洗涤、干燥、提取，得到UIO-66-NH₂材料粗品，再采用甲醇对粗品进行洗涤，最后烘干后密闭保存。

3.根据权利要求1所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(2)中，步骤(1)所得血清处理液与UIO-66-NH₂材料的体积质量比例是2:8～10，血清处理液以mL计，UIO-66-NH₂材料以mg计。

4.根据权利要求1～3任一所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(2)中漩涡振荡萃取时间5～7min，漩涡振荡萃取完毕后，离心10～20min得到含有唾液酸的UIO-66-NH₂材料。

5.根据权利要求1所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(3)中乙酸水溶液中乙酸的质量百分数为4～6％。

6.根据权利要求1所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(3)中乙酸水溶液与步骤(2)中UIO-66-NH₂材料的体积质量比例是0.2:8～10，乙酸水溶液以mL计，UIO-66-NH₂材料以mg计。

7.根据权利要求5或6所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(3)中洗脱时间为5～7min。

8.根据权利要求1所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(4)中荧光衍生试剂为2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基肼基甲酸酯。

9.根据权利要求1所述的采用UIO-66-NH₂材料测定血清中唾液酸含量的方法，其特征在于：步骤(4)中柱前衍生步骤如下：向2mL安瓿瓶中依次加入200μL浓度为0.01mol/L的2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基肼基甲酸酯乙腈溶液、45μL冰乙酸、200μL洗脱液，封口后在70℃下反应65min，取出冷却后，加入乙腈定容到1mL，再经0.22μm尼龙滤膜过滤。