[发明专利]牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法在审
| 申请号： | 201610271133.1 | 申请日： | 2016-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN105755084A | 公开（公告）日： | 2016-07-13 |
| 发明（设计）人： | 李健 | 申请（专利权）人： | 李健 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K14/47;C07K1/34 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 250000 山东省济*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 牛乳 蛋白酶 cpps 制作方法 | ||
1.一种牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）从牛乳中提取酪蛋白；
（2）配制酪蛋白溶液，用NaOH调节溶液PH值至8.6；
（3）配制胰蛋白酶溶液，使溶液PH值为8.6；
（4）将胰蛋白酶溶液加入到酪蛋白溶液中进行酶解反应，得到酪蛋白酶解液；
（5）取酪蛋白酶解液经中空纤维超滤膜分离出分子量为2000-4000的多肽溶液进行真空干燥，得到酪蛋白磷酸肽。
2.根据权利要求1所述的牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，所述步骤（1）采用新鲜牛乳与醋酸钠缓冲液在40-50℃下分别加热至相同温度后混匀，以2000r/min离心5-10min，静置后分离出一次沉淀；向所述一次沉淀中加入一定量95%的乙醇，以2000r/min离心5-10min后静置，分离出二次沉淀得到酪蛋白。
3.根据权利要求2所述的牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，所述新鲜牛乳与醋酸钠缓冲液各取5-10ml。
4.根据权利要求2所述的牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，所述乙醇为4-8ml。
5.根据权利要求1所述的牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，所述步骤（2）中的酪蛋白溶液的制作方法为：将酪蛋白溶解在0.05mol/L的三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液中。
6.根据权利要求5所述的牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，在所述酪蛋白溶液中加入少量的叠氮化钠。
7.根据权利要求1所述的牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，所述步骤（3）中的胰蛋白酶溶液的制作方法为：将胰蛋白酶溶解在0.05mol/LTris-HCl缓冲液（PH=8.6）中。
8.根据权利要求1所述的牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，其特征在于，所述步骤（4）中将一定量的胰蛋白酶溶液加入到酪蛋白溶液中，混合后置于37-40℃水浴中反应，待反应达到特定时间后，将反应液置于90-95℃水浴中加热10-15min，使酶解反应终止，反应液冷却至室温后，在10000r/min的条件下离心15-20min，取上清液酪蛋白酶解液。
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