[发明专利]一种细胞系及其应用

权利要求书

1.一种单克隆细胞系Vero/DogSLAM细胞系Vero/DogSLAM-1F5株，其中，所述Vero/DogSLAM细胞系Vero/DogSLAM-1F5株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO.C201611，保藏地址为中国武汉·武汉大学，保藏日期为2016年03月29日。

2.一种使用权利要求1所述单克隆细胞系Vero/DogSLAM-1F5株分离犬瘟热病毒毒株的方法，其中，所述方法包括：将感染犬瘟热病毒毒株的动物源来源进行研磨或处理，再将不同研磨液或处理液接种于权利要求1所述单克隆细胞系Vero/DogSLAM-1F5株进行病毒分离，传代稳定发生细胞融合病变后，冻融收毒；优选地，所述方法中所述感染犬瘟热病毒的动物源包括犬科源、猫科源、灵猫科源、熊科源、海豹科源、猫熊科源、臭鼬科源、浣熊科源、鼬科源、猴科源和西猯科源，所述感染犬瘟热病毒毒株的动物源来源包括肺脏、肝脏、脾脏、肠、大脑、小脑、肾脏、粪便、尿液、眼鼻拭子和/或外周血淋巴细胞。

3.根据权利要求2所述方法分离得到的一种犬瘟热病毒毒株，其中，所述犬瘟热病毒毒株基因组中含有编码SEQ ID NO.2所示H蛋白的基因和/或编码SEQ ID NO.4所示F蛋白的基因。

4.根据权利要求3所述的犬瘟热病毒毒株，所述犬瘟热病毒毒株为犬瘟热病毒C/HN/001株，所述犬瘟热病毒C/HN/001株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO.V201604，保藏地址为中国武汉·武汉大学，保藏日期为2016年3月29日。

5.一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的权利要求3或4所述犬瘟热病毒毒株的抗原和兽医学上可接受的载体，所述犬瘟热病毒毒株的抗原包括灭活的全病毒抗原和/或至少一种亚单位抗原；优选地，所述疫苗组合物包括免疫量的犬瘟热病毒C/HN/001株抗原和兽医学上可接受的载体。

6.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括灭活的全病毒抗原和佐剂；其中，所述灭活的全病毒抗原含量为灭活前10^4-10⁹TCID₅₀/ml；优选地，所述灭活的全病毒抗原含量为灭活前10^5-10⁷TCID₅₀/ml；或

所述疫苗组合物包括H蛋白和佐剂，所述H蛋白氨基酸序列为SEQ ID No.2编码的氨基酸序列，所述H蛋白含量为10-200μg/ml；优选地，所述疫苗组合物还包括F蛋白和/或M蛋白，所述F蛋白氨基酸序列为SEQ ID No.4编码的氨基酸序列；所述F蛋白含量为10-160μg/ml，所述M蛋白含量为10-180μg/ml；

其中，所述佐剂包括铝胶佐剂、皂苷、油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂、丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基(alkenyl)衍生物的共聚物、RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽或Gel佐剂中的一种或几种。

7.根据权利要求5-6任一项所述疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物还包括犬细小病毒抗原、犬腺病毒抗原、犬钩端螺旋体抗原、犬冠状病毒抗原、犬副流感病毒抗原、狂犬病病毒抗原、犬流感病毒抗原、犬呼肠病毒抗原、犬伪狂犬病毒抗原、犬轮状病毒抗原、犬疱疹病毒抗原、犬病毒性乳头瘤病毒抗原、犬微小病毒抗原、犬腮腺炎病毒抗原、犬淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、支气管败血波氏杆菌抗原的一种或多种；优选地，所述疫苗组合物还包括犬细小病毒抗原、犬腺病毒抗原、犬钩端螺旋体抗原、犬冠状病毒抗原、犬副流感病毒抗原、狂犬病病毒抗原、犬流感病毒抗原的一种或多种。

8.根据权利要求4-6任一项所述疫苗组合物在制备预防和/或治疗犬瘟热相关疾病的药物中的应用；优选地，所述犬瘟热相关疾病感染宿主包括犬科、浣熊科和鼬科动物；更优选地,所述犬瘟热相关疾病感染宿主包括犬、狐狸、貉子、水貂。

9.一种犬瘟热病毒毒株H蛋白，所述犬瘟热病毒毒株H蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。

10.一种犬瘟热病毒毒株F蛋白，所述犬瘟热病毒毒株F蛋白具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。