[发明专利]一种同时检测血浆中福沙匹坦和阿瑞匹坦的方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，涉及体内药物的分析测定方法，具体涉及同时检测血浆中福沙匹坦和阿瑞匹坦的方法。

背景技术

阿瑞匹坦(Aprepitant)口服制剂是美国FDA批准的首个P物质/NK-1受体拮抗剂。在临床上，阿瑞匹坦与其他止吐药联用可以预防抗癌药及化疗药引起的急性和延迟性恶心、呕吐。但是，对于有严重呕吐症状的病人来说，连续服用阿瑞匹坦制剂难以实现。福沙匹坦双葡甲胺(Fosaprepitant dimeglumine)是阿瑞匹坦(Aprepitant)水溶性的前体药物，静滴后能在体内能迅速转化为阿瑞匹坦。因此，同时测定体内福沙匹坦和阿瑞匹坦的浓度，评价这两个化合物在机体内的药代动力学过程，对于福沙匹坦制剂的研发、评价其质量有至关重要的作用。

由于福沙匹坦和阿瑞匹坦性质差异大，且福沙匹坦中特殊的磷酸基团结构，目前测定生物样品中这两种化合物的方法为：分别用不同的方法提取分离并测定。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种同时检测血浆中福沙匹坦和阿瑞匹坦的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种同时检测血浆中福沙匹坦和阿瑞匹坦的方法，采用高效液相色谱串联质谱技术检测经预处理的校正标样和经预处理的血浆样品，利用内标法定量，以福沙匹坦和阿瑞匹坦校正标样的浓度为X轴，福沙匹坦和阿瑞匹坦与内标的峰面积比值为Y轴，建立标准曲线方程，将血浆样品中福沙匹坦和阿瑞匹坦与内标峰面积的比值代入标准曲线方程中，计算福沙匹坦和阿瑞匹坦的浓度，具体色谱条件为：

(1)高效液相色谱条件：

流动相A：10mM乙酸铵和0.02g/100mL EDTA水溶液；

流动相B：乙腈；

色谱柱：Waters XTerra MS C18，2.1×50mm，3.5μm；

采用梯度洗脱方式，见表1；

柱温：30℃；

进样量5μL；

表1流动相梯度洗脱参数

表2福沙匹坦、阿瑞匹坦和内标的质谱参数

(2)质谱条件：采用ESI离子源、正离子MRM模式检测，离子源参数如下：CAD：4；CUR：10；GS1：60；GS2：50；IS：5000；TEM：600；主要化合物其他相关参数见表2。

其中，所述的血浆为人或动物的血浆。

其中，所述的经预处理的血浆样品按照如下方法制备得到：取血浆样品100μL，加入甲醇和稀释液各10μL，加入内标0.999μg·mL^-1格列苯脲30μL，加入乙腈300μL，涡旋1min混匀，12000rmp 10min，4℃离心，吸取上清液，即得。

其中，校正标样按如下方法制备得到：

精密称取10.89mg福沙匹坦双葡甲胺对照品至10mL容量瓶中，加入稀释液定容至刻度，混匀得到0.666mg·mL^-1福沙匹坦标准曲线储备液；精密量取适量储备液以稀释液稀释至浓度为100μg·mL^-1福沙匹坦溶液；再以稀释液依次稀释，配成浓度分别为0.200μg·mL^-1、0.400μg·mL^-1、1.00μg·mL^-1、2.50μg·mL^-1、5.00μg·mL^-1、20.0μg·mL^-1和50.0μg·mL^-1的福沙匹坦标准曲线工作液，于-20℃冰箱中保存备用；

精密称取12.16mg阿瑞匹坦对照品至10mL容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，混匀得到1.216mg·mL^-1阿瑞匹坦标准曲线储备液，于-20℃冰箱中保存备用；精密量取适量储备液以甲醇稀释至浓度为50.0μg·mL^-1阿瑞匹坦溶液；再以甲醇液依次稀释，配成浓度分别为0.100μg·mL^-1、0.200μg·mL^-1、0.400μg·mL^-1、1.00μg·mL^-1、2.50μg·mL^-1、10.0μg·mL^-1和20.0μg·mL^-1的阿瑞匹坦标准曲线工作液，于-20℃冰箱中保存备用；