[发明专利]一种猪流感阳性血清的制备方法

权利要求书

1.一种猪流感阳性血清的制备方法，其特征在于：其包括如下步骤：

1)选择2～4月龄的鸡；

2）用猪流感灭活疫苗对鸡进行多次免疫接种：对鸡采用皮下及肌肉多点注射方式免疫 猪流感灭活疫苗，第1次免疫0.5-0.6mL，以后每隔14～15天免疫一次，每次免疫量为每只鸡 每次依上次免疫量增加0.5-0.6mL，总共免疫4次以上；

从第3次免疫开始，每次免疫前1天，采少量免疫鸡的鸡血用0.5%鸡红细胞悬液进行HI 试验，检测HI抗体滴度，当检测到HI抗体滴度≥1:1024，用心脏采血法对免疫鸡进行无菌采 血；

3）上述步骤采血得到的鸡血在37℃环境放置2～3h，然后将鸡血移入2～8℃冰箱12～ 24h；

4）上述鸡血以3000～3500r/min的转速离心10-15min，分离收获上清液，

5）将上清液于56℃下灭活30-35min，得到灭活后的血清，过滤，得到猪流感阳性血清。

2.根据权利要求1所述的一种猪流感阳性血清的制备方法，其特征在于：所述步骤1）， 选择健康、精神状态良好的鸡。

3.根据权利要求1所述的一种猪流感阳性血清的制备方法，其特征在于：所述步骤2）， 猪流感灭活疫苗的制备方法如下：将猪流感病毒毒株接种9-10日龄SPF鸡胚，每胚0.2ml，35 ℃培养72h，将死胚弃去，余下的鸡胚置2-8℃冰箱保存12-24h，收取鸡胚尿囊液并经0.20- 0.22微米滤膜过滤，然后将鸡胚尿囊液超滤浓缩至HA效价≥2⁹，浓缩后的鸡胚尿囊液加入 鸡胚尿囊液体积分数0.05%的β-丙内酯溶液，灭活后用常规方法乳化分装，得到猪流感灭活 疫苗。

4.根据权利要求3所述的一种猪流感阳性血清的制备方法，其特征在于：所述猪流感病 毒毒株为猪流感病毒H1N1株或猪流感病毒H3N2株。

5.根据权利要求1所述的一种猪流感阳性血清的制备方法，其特征在于：所述步骤7）， 灭活后的血清用0.20-0.22微米滤膜过滤，无菌分装，得到猪流感阳性血清。