[发明专利]一种用于检测人源性HSP70-1基因表达水平的引物组合物及其应用有效

申请号：	201610303563.7	申请日：	2016-05-09
公开（公告）号：	CN107201398B	公开（公告）日：	2020-03-24
发明（设计）人：	靳令经;蒋明;于丽华;符星	申请（专利权）人：	上海市同济医院
主分类号：	C12Q1/6883	分类号：	C12Q1/6883;C12N15/11
代理公司：	上海申新律师事务所 31272	代理人：	竺路玲
地址：	200333 ***	国省代码：	上海;31
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	一种用于检测人源性 hsp70 基因表达水平引物组合及其应用
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【权利要求书】：

1.一种用于检测人源性HSP70-1基因表达水平的引物组合物，其特征在于：由引物组1和引物组2组成；所述引物组1用于HSP70-1基因检测，所述引物组2用于RPL19内参基因检测；所述引物组1由序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物组成；所述引物组2由序列为SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的引物组成；

其中，所述的引物组1和引物组2的上游和下游引物的浓度均为0.1-0.5μM。

2.根据权利要求1所述的引物组合物在制备用于检测人源性HSP70-1基因表达水平的试剂中的应用。

3.根据权利要求1所述的引物组合物在筛选RNA干扰序列方法中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，采用2^-△△CT相对定量方法计算不同RNA干扰序列样品的HSP70-1基因表达水平，筛选出表达水平最低的RNA干扰序列。

5.一种用于检测人源性HSP70-1基因表达水平的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物组合物和荧光染料。

6.根据权利要求5所述的一种用于检测人源性HSP70-1基因表达水平的试剂盒，其特征在于，所述的荧光染料是SYBR Green荧光染料。

7.一种非诊断治疗目的的用于检测人源性HSP70-1基因表达水平的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：提取样品中RNA；

步骤2：将步骤1中提取出来的RNA反转录成cDNA；

步骤3：以权利要求1中所述的引物组为引物，用荧光定量PCR法检测HSP70-1基因以及RPL19内参基因表达水平。

8.根据权利要求7所述的一种用于检测人源性HSP70-1基因表达水平的方法，其特征在于，步骤3中荧光定量PCR反应条件为95℃预变性5min；95℃变性10s，60℃退火34s运行40个循环；最后40℃10s结束反应。

下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。