[发明专利]一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法

权利要求书

1.一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)分别向A、B离心管中加入单链DNA溶液；

(2)向步骤(1)中得到的B离心管溶液加入含有青蒿素或其衍生物的丙酮溶液，A离心管 加入等量丙酮溶液；

(3)向步骤(2)中得到的A、B离心管溶液分别加入亚铁离子溶液并混合均匀，反应一段 时间，当青蒿素或其衍生物存在时将反应产生自由基，从而破坏单链DNA，若不存在则没有 自由基产生，单链DNA结构保持完整；

(4)向步骤(3)中得到的A、B离心管溶液分别加入纳米金胶体溶液并混合均匀，观察到B 离心管中混合物颜色由酒红色变为蓝紫色，即指示了青蒿素或其衍生物的存在；而A离心管 混合物中不存在青蒿素或其衍生物，没有自由基产生，纳米金胶体得到了结构完整的单链 DNA的保护，保持分散状态的酒红色；

(5)通过紫外分光光度计测定A、B离心管溶液的吸光度，当B离心管溶液有青蒿素或 其衍生物存在时吸收峰红移；

(6)配制梯度浓度的青蒿素或其衍生物的标准溶液，经过上述步骤后依次测定吸光度， 以吸光度比值对浓度绘制标准曲线，利用该标准曲线实现对样品中青蒿素或其衍生物的含量 测定。

2.如权利要求1所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于：所述 步骤(4)使用的纳米金胶体为柠檬酸钠还原法制备而成，粒径10-20nm，浓度为35nM，青蒿 素或其衍生物的检测使用量为360μL。

3.如权利要求1和2所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于所 述步骤(3)的反应时间范围为5-10min，优选8min。

4.如权利要求1所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于：所述 步骤(1)单链DNA分子，长度为7bp，序列为5’～CCAACCA～3’，浓度为20μM，检测使 用量为5-10μL，优选7μL。

5.如权利要求1所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于：所述 步骤(2)加入丙酮体积为40μL。

6.如权利要求1所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于：所述 步骤(3)亚铁离子的使用浓度为1.0％-1.5％，优选1％，检测使用量为16-22μL，优选18μL。

7.如权利要求1所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于：所述 步骤(5)、(6)所述的波长为610nm和540nm；以两波长处吸光度比值(A610/A540)为标准 曲线的纵坐标做图。

8.如权利要求1所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于：对青 蒿素及其衍生物的检出限为1μM。

9.如权利要求1所述的一种比色检测青蒿素及其衍生物的分析方法，其特征在于：对检 测青蒿素及其衍生物的检测线性范围为3-40μM。