[发明专利]一种舒伯特气单胞菌特异性引物及其在大菱鲆养殖过程中的应用在审
申请号: | 201610308350.3 | 申请日: | 2016-05-11 |
公开(公告)号: | CN105734165A | 公开(公告)日: | 2016-07-06 |
发明(设计)人: | 刘宏生;顾颖;张新刚;胡桓;艾海新 | 申请(专利权)人: | 辽宁大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 | 代理人: | 金春华 |
地址: | 110000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 舒伯特 气单胞菌 特异性 引物 及其 大菱鲆 养殖 过程 中的 应用 | ||
1.一种舒伯特气单胞菌特异性引物,其特征在于:所述的舒伯特气单胞菌特异性引物由上游引物F和下游引物R构成;
所述的上游引物F的序列为:GGGCCCGTTATGACCAGTTT;
所述的下游引物R的序列为:AGGAGTGATCTTGAGCTTGACC。
2.根据权利要求1所述的一种舒伯特气单胞菌特异性引物,其特征在于:所述的舒伯特气单胞菌是Aeromonasschubertii。
3.权利要求1或2所述的舒伯特气单胞菌特异性引物在大菱鲆养殖过程中的应用。
4.一种大菱鲆养殖过程中舒伯特气单胞菌的PCR检测方法,其特征在于方法如下:
1)提取大菱鲆病灶部位细菌的总DNA;
2)以所提取的DNA为模板,采用权利要求1或2所述的舒伯特气单胞菌特异性引物,进行PCR扩增;
3)根据PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果判断大菱鲆是否被舒伯特气单胞菌感染;如果琼脂糖凝胶呈现结果有704bp条带产生,则大菱鲆被舒伯特气单胞菌感染,否则没有被感染。
5.根据权利要求4所述的一种大菱鲆养殖过程中舒伯特气单胞菌的PCR检测方法,其特征在于:
PCR反应条件:第一阶段:94℃1min;
第二阶段:94℃30s,60℃1min,72℃30s;30循环;
第三阶段:72℃2min;
第四阶段:4℃保存。
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