[发明专利]用于鉴定脂肪间充质干细胞的试剂盒有效
申请号: | 201610312843.4 | 申请日: | 2016-05-11 |
公开(公告)号: | CN105866431B | 公开(公告)日: | 2018-01-23 |
发明(设计)人: | 刘俊江;鲁振宇;黄文敬;韩洪起;张冰晶;秦臻;徐悦 | 申请(专利权)人: | 天津欣普赛尔生物医药科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569;C12N5/077 |
代理公司: | 天津才智专利商标代理有限公司12108 | 代理人: | 王晓红 |
地址: | 300403 天津市北*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 脂肪 间充质 干细胞 试剂盒 | ||
1.一种用于鉴定脂肪间充质干细胞的试剂盒,其特征在于,包括流式表型检测试剂套装、细胞固定液、普通培养基、成脂分化诱导及检测试剂套装、成骨分化诱导及检测试剂套装、成软骨分化诱导及检测试剂套装;
所述流式表型检测试剂套装:包括CD73抗体、CD90抗体、CD105抗体、CD34抗体、CD45抗体、CD49d抗体、CD106抗体、IgG1抗体,每只均为200uL;
所述成脂分化诱导及检测试剂套装:包括100mL成脂诱导培养基和10mL成脂分化检测试剂,成脂诱导培养基为含有0.2-2mmoL/L谷氨酰胺、1-20μg/mL IGF-2、2-5mmol/L 3-磷酸甘油、0.25-1mmoL/L倍氯米松、0.1-0.5mmoL/L异丁基甲基黄嘌呤、100-200μmoL/L吲哚美辛、1-50μmoL/L乙酰CoA、体积分数2-10%胎牛血清的AMEM培养基;
所述成骨分化诱导及检测试剂套装:包括100mL成骨诱导培养基和10mL成骨分化检测试剂,成骨诱导培养基为含有0.5-2mmoL/L谷氨酰胺、0.5-2mmoL/L倍氯米松、5-20μg/mL TGF-β、2-10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、15-25mmol/L维生素D3、20-30mmol/L维生素C、体积分数2-10%胎牛血的AMEM培养基;
所述成软骨分化诱导及检测试剂套装:包括100mL成软骨诱导培养基和10mL成软骨分化检测试剂,成软骨诱导培养基为含有5-10ng/ml TGF-β1、20-50mg/L维生素C、10-20nmol/L倍他米松、50-100mg/ml ITS、10-60mmol/L氨基葡萄糖、1-20mmol/L丙酮酸钠、2-10ug/mg亚油酸、1-8ng/ml人血清白蛋白、10-20mmol/Lβ-甘油磷酸钠、体积分数2-10%胎牛血清的AMEM培养基;
所述普通培养基为20mL含体积分数2-8%胎牛血清的AMEM培养基。
2.根据权利要求1所述的用于鉴定脂肪间充质干细胞的试剂盒,其特征在于,所述细胞固定液为20mL质量百分比浓度4%多聚甲醛的水溶液。
3.根据权利要求1所述的用于鉴定脂肪间充质干细胞的试剂盒,其特征在于,所述成骨分化检测试剂为含有1g/L茜素磺酸钠水溶液。
4.根据权利要求1所述的用于鉴定脂肪间充质干细胞的试剂盒,其特征在于,所述成脂分化检测试剂为含有质量体积分数为0.5%油红O的异丙醇溶液。
5.根据权利要求1所述的用于鉴定脂肪间充质干细胞的试剂盒,其特征在于,所述成软骨分化检测试剂为含有10g/L阿尔新兰、质量体积分数3%醋酸的水溶液。
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