[发明专利]一种采用高效液相色谱法检测乳中克拉维酸的方法及应用在审
申请号: | 201610317021.5 | 申请日: | 2016-05-12 |
公开(公告)号: | CN105784876A | 公开(公告)日: | 2016-07-20 |
发明(设计)人: | 于国萍;郭佩佩;藏小丹;姚宇秀;岳崇慧;范美婧;陈媛;陈超;王艳菲 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 樊锦标 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 采用 高效 色谱 检测 乳中 克拉 方法 应用 | ||
1.一种采用高效液相色谱法检测乳中克拉维酸的方法,其特征在于,步骤如下:
1)将样品进行前处理;
2)按照如下色谱条件利用高效液相色谱进行测定;所述色谱条件为:色谱柱为C18色谱 柱;检测波长为210nm-220nm;流动相为磷酸二氢钾溶液-甲醇;流速为0.7mL/min-1.2 mL/min;进样量为10μL;洗脱时间为10min。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述前处理,是称取1份牛奶与乙腈混合,震荡 混匀后离心,取上清液与正己烷混合,震荡混匀后离心,弃去正己烷层,氮气吹干后,用 流动相复溶,最后过微孔滤膜。
3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述磷酸二氢钾溶液浓度为0.0125mol/L-0.05 mol/L;pH为4-5。
4.根据权利要求3所述方法,其特征在于,所述磷酸二氢钾溶液浓度为0.025mol/L;pH为 4.5。
5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述磷酸二氢钾溶液-甲醇,体积比为95:5-90:10。
6.根据权利要求5所述方法,其特征在于,所述磷酸二氢钾溶液-甲醇,体积比为95:5。
7.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述C18色谱柱,规格为4.6mm×250mm,5μm。
8.根据权利要求1所述方法,其特征在于,具体步骤如下:
1)将样品进行前处理:称取1份牛奶与3份-5份乙腈混合于离心管中,震荡混匀后离心,取上 清液与4份-6份正己烷混合于另一离心管中,震荡混匀后离心,弃去正己烷层,在35℃ -45℃氮气吹干后,用流动相复溶,最后过微孔滤膜;
2)按照如下色谱条件利用高效液相色谱进行测定;所述色谱条件为:色谱柱为4.6mm×250 mm,5μm的C18色谱柱;检测波长为210-220nm;流动相为体积比为95:5-90:10的磷酸 二氢钾溶液-甲醇;流速为0.7mL/min-1.2mL/min;进样量为10μL;洗脱时间为10min; 所述磷酸二氢钾溶液浓度为0.0125mol/L-0.05mol/L,pH为4-5。
9.根据权利要求1所述方法,其特征在于,具体步骤如下:
1)将样品进行前处理:称取1份牛奶与4份乙腈混合于离心管中,震荡混匀后离心,取上清 液与5份正己烷混合于另一离心管中,震荡混匀后离心,弃去正己烷层,在40℃氮气吹干 后,用流动相复溶,最后过微孔滤膜;
2)按照如下色谱条件利用高效液相色谱进行测定;所述色谱条件为:色谱柱为4.6mm×250 mm,5μm的C18色谱柱;检测波长为217nm;流动相为体积比为95:5的磷酸二氢钾溶液 -甲醇;流速:1.0mL/min;进样量为10μL;洗脱时间为10min;所述磷酸二氢钾溶液浓 度为0.025mol/L,pH为4.5。
10.权利要求1-9所述任一方法在检测克拉维酸中的应用。
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