[发明专利]B细胞抗原受体H链CDR3的处理方法

权利要求书

1.一种B细胞抗原受体H链CDR3的处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

设置实验组与对照组，每组包括若干份相异人体的已经脱离人体的外周血标本；

分离各所述外周血标本的B细胞，并分别提取所述外周血标本B细胞中的DNA；

采用多重PCR技术，扩增出B细胞受体H链的CDR3区；

对所述B细胞受体H链的CDR3区进行高通量测序，并对所述实验组及对照组中B细胞受体H链进行数据分析。

2.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，采用多重PCR技术之前，所述处理方法还包括测定DNA的含量以及检测DNA完整性的步骤。

3.根据权利要求2所述的处理方法，其特征在于，采用荧光分析法测定DNA的含量。

4.根据权利要求2所述的处理方法，其特征在于，用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA完整性。

5.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，利用Illumina MiSeq平台对CDR3区进行高通量测序。

6.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，采用多重PCR技术，扩增出B细胞受体H链的CDR3区，包括构建DNA文库。

7.根据权利要求6所述的处理方法，其特征在于，构建DNA文库后，还包括检测所述DNA文库的插入片段范围及对所述DNA文库的浓度进行定量。

8.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，对所述实验组及对照组中B细胞受体H链进行数据分析包括：对测序数据进行质控和预处理、对数据进行比对分析、对序列结构进行分析、构建免疫组库及对免疫组库进行差异分析。

9.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，分离各所述外周血标本的B细胞包括：分离出所述外周血标本的淋巴细胞及分离出所述淋巴细胞中的 B细胞。

10.根据权利要求9所述的处理方法，其特征在于，采用Ficoll密度梯度离心法分离出所述外周血标本的淋巴细胞。