[发明专利]TCRβ链互补决定区的处理方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种获取作为中间结果的围手术期肝移植受者信息，特别是涉及一种TCRβ链互补决定区的处理方法。

背景技术

肝硬化(liver Cirrhosis，LC)是一种常见的慢性肝病，是由单一的或很多种致病因素持续作用于肝脏，引起肝脏实质弥漫性损伤等进一步引起一系列肝功损伤，最终发展成门脉高压或晚期肝病的结局。其特点是主要由于肝细胞变性坏死，残存的肝细胞结节再生以及纤维组织再生，导致肝变形变硬等，已超出肝细胞的代偿能力。其主要发病机制是发生了肝纤维化。肝纤维化是由于肝组织内细胞外的胶原纤维发生了持续大量的增殖，从而不断挤压肝细胞并逐渐将其包围起来形成纤维隔，最终导致肝结构及功能发生了病理性改变的结果。按照临床表现情况不同肝硬化可分为代偿期(早期)和失代偿期(晚期)，并且它们的分界线不明显而且常呈现重叠征象。代偿期症状较轻常缺乏特异性，一般没有明显的临床表现，甚至身体上也没有感觉到任何的不适，主要以疲倦乏力、消瘦、腹部胀气、腹泻、上腹不适及隐痛为主，行肝功能检查时各项指标可在正常范围内或出现轻度异常，这种情况多见于小结节性肝硬化；失代偿期症状显著，常伴随各种并发症出现，主要表现为肝功能衰退，常伴有多器官功能受损、黄疸、门脉高压、脾大、腹水、肝性脑病或上消化道出血等，行肝功能检查时各指标明显异常，多见于大结节性肝硬化，因此，临床上通常将血常规、尿常规、肝功能和腹水常规以及必要条件下结合影像学检查来诊断肝硬化，而且从它们的各项指标的检查以及临床表现可不难判断失代偿期肝硬化，但代偿期肝硬化的诊断却比较艰难。

而失代偿期乙型肝炎肝硬化主要是因为乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)持续感染患者并反复作用于病灶部位导致肝细胞受损严重、不断凋亡等 而导致肝功能受到严重破坏而引起机体的一系列生理病理的改变，出现黄疸、食管静脉曲张、腹水、肝脑疾病和脾脏肿大等临床特征。在我国，乙型病毒性肝炎是引起肝硬化的主要因素，其次是丙型病毒性肝炎，其中慢性乙型肝炎病毒感染已成为全世界公共健康卫生问题。据世界卫生组织报道，全球每年约有100万人死于HBV感染所致肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌，严重影响我国居民身体健康和国民经济，阻止患者疾病病情的发展并降低病死率的重要手段就是进行准确的诊断和早期及时进行治疗。有文献报道，有40％以上的慢性乙型肝炎病毒感染的患者会发展成严重的并发症，约12％的乙肝肝硬化患者死于肝衰竭，10％左右的死于肝癌。由于临床表现的多样性和复杂的病理过程以及代偿期与失代偿期之间的分界不明显甚至出现重叠现象，给疾病早期及准确的诊断提出了巨大的挑战。使得失代偿期乙肝肝硬化的预后很差，并且多半患者在5年内病情发展急速恶化，只有约14％的患者有5年以上的存活率。

目前，肝移植是治疗晚期不可逆肝病患者唯一的方法，给患者提供了一个再生的机会，但由于供肝资源短缺以及配型不符等问题使得世界各地的许多失代偿期乙肝肝硬化患者无法获得或者没有资格获得这种治疗方式，而对这些病人唯一的救治方法就是进行抗病毒治疗。抗病毒治疗是抑制慢性乙肝肝硬化患者和失代偿期乙肝患者体内HBV的复制来减少肝脏坏死性炎症反应并改善其肝功能情况。近十多年肝移植术的发展和免疫抑制剂的问世以及移植收术的提高，我国每年的移植病例数不断在增加，在美国每年所完成的肝移植病例数中，约5％都是乙肝肝移植，这比例在亚太地区已经是比较高的。自从1963年美国Starzl进行了第1例人体原位肝移植到现在，无论在移植的数量还是移植的数量和临床疗效方面都取得了很大的成就。但是随着移植数量的积累，肝移植后出现的排斥反应等各种并发症仍然避免不了，其中与免疫相关的问题成为影响术后生存率的主要因素。大部分乙肝患者以及行肝移植后手术患者都是通过抗病毒药物和免疫抑制剂进行治疗，但因为长期使用这类药物会造成免疫力降低，从而使得患者更易受到其他病原体的感染，还会发生耐药，一旦出现耐药就会降低疗效，甚至会导致病情加重。

发明内容

基于此，有必要针对上述问题，提供一种围手术期肝移植受者TCRβ链互补决定区的处理方法。

一种TCRβ链互补决定区的处理方法，包括以下步骤：

设置实验组与对照组，每组包括若干份相异人体的已经脱离人体的外周血标本；

分离各所述外周血标本的淋巴细胞，并分别提取所述外周血标本淋巴细胞中的DNA；

采用多重PCR技术，构建DNA文库；

对所述DNA文库进行高通量测序，对所述实验组及对照组中的TCRβ链互补决定区进行数据分析。