[发明专利]一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法，其特症在于，本试剂盒包括PVC底板、荧光结合垫、硝酸纤维素膜、样品垫和吸水垫。

2.所述荧光结合垫上包被有CdtB抗原-纳米荧光微球复合物、鸡IgY-纳米荧光微球复合物；硝酸纤维素膜上有CdtB抗原构成的检测线和兔抗鸡IgY抗体构成的质控线。

3.如权利要求1所述的一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法，其特症在于，所述的纳米荧光微球为醛基化红荧光微球，纳米颗粒粒径为100~200nm，激发波长为365nm，发射波长为612±5nm，表面醛基基团含量为0.1～0.5mmol/g。

4.如权利要求1所述的一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法，其特症在于，通过醛基荧光微球与CdtB抗原蛋白末端的氨基残基在弱碱性环境下醛胺缩合制备得到CdtB抗原-纳米荧光微球复合物用于特异性结合受试者血清、血浆或全血中的CdtB抗体。

5.如权利要求1所述的一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法，其特症在于荧光微球纳米颗粒与CdtB抗原蛋白或鸡IgY按照一定比例（ul：ug）分别混合，25-37℃反应1～4小时，分别制备得到CdtB抗原-纳米荧光微球复合物及鸡IgY-纳米荧光微球复合物。

6.如权利要求1所述的一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法，其特症在于荧光结合垫的制备：将荧光结合垫切成9mm×300mm细条，将CdtB抗原-纳米荧光微球复合物及鸡IgY-纳米荧光微球复合物按照一定比例混合均匀铺在荧光结合垫上，25～37℃烤干或-20～-60℃冻干得到制备好的荧光结合垫。

7.如权利要求1所述的一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法，其特症在于，将硝酸纤维素膜贴于PVC底板上。

8.将兔抗鸡IgY用PBS稀释到浓度为0.1-2mg/ml，作为C线包被液；将CdtB蛋白用PBS稀释到浓度为0.1-2mg/ml，作为T线。

9.通过喷膜仪，将T线包被液和C线包被液在硝酸纤维素膜上均匀划线得到检测线和质控线，25-37℃烤干，依次组装荧光结合垫、样品垫和吸水垫并斩切切条后即可得到检测试纸条。

10.如权利要求1所述的一种肠易激综合症标志物CdtB抗体检测试剂盒及其制备方法，其特症在于检测样品为血清、血浆或全血。