[发明专利]一种九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测用免疫层析试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，该试剂盒包括具有三个视窗的壳体，所述壳体内放置第一试纸条、第二试纸条和第三试纸条，所述第一试纸条、第二试纸条和第三试纸条均包括塑料板、设置在塑料板上的玻璃纤维素膜、设置在玻璃纤维素膜上的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上一端设有样本垫，对应的另一端设有吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设置有检测线1、检测线2、检测线3和控制线；所述第一试纸条的玻璃纤维素膜上包被有量子点标记的嗜肺军团菌血清1型抗体、量子点标记的肺炎支原体抗体和量子点标记的Q热立克次体抗体的混合物；所述第一试纸条的检测线1上包被有嗜肺军团菌血清1型抗原，检测线2上包被有肺炎支原体抗原，检测线3上包被有Q热立克次体抗原；所述第二试纸条的玻璃纤维素膜上包被有量子点标记的肺炎衣原体抗体、量子点标记的腺病毒抗体、量子点标记的呼吸道合胞病毒抗体的混合物；所述第二试纸条的检测线1上包被有肺炎衣原体抗原，检测线2上包被有腺病毒抗原，检测线3上包被有呼吸道合胞病毒抗原；所述第三试纸条的玻璃纤维素膜上包被有量子点标记的甲型流感病毒抗体、量子点标记的乙型流感病毒抗体和量子点标记的副流感病毒抗体的混合物；所述第三试纸条检测线1上包被有甲型流感病毒抗原，检测线2上包被有乙型流感病毒抗原，检测线3上包被有副流感病毒抗原；所述第一试纸条、第二试纸条和第三试纸条的控制线上均包被有羊抗鼠IgG；

其制备方法包括以下操作步骤：

第一、制备第一试纸条：

1)原材料的制备：

A：制备玻璃纤维素膜：将量子点标记的嗜肺军团菌血清1型抗体、量子点标记的肺炎支原体抗体、量子点标记的Q热立克次体抗体混合包被在玻璃纤维素膜上，干燥，备用；

B：制备硝酸纤维素膜：取硝酸纤维素膜，间隔划分出检测线1、检测线2、检测线3和控制线，然后将嗜肺军团菌血清1型抗原、肺炎支原体抗原、Q热立克次体抗原、羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线1、检测线2、检测线3和控制线上，之后将包被后的硝酸纤维素膜放入封闭液中封闭，干燥，备用；

2)组装：在塑料板上放置步骤1)制备的玻璃纤维素膜，然后在步骤1)制备的玻璃纤维素膜上放置步骤1)制备的硝酸纤维素膜，然后在硝酸纤维素的一端放置样品垫，对应的另一端放置吸水垫，干燥，即得第一试纸条；

第二、按照上述第一试纸条同样的制备方法制备第二试纸条和第三试纸条；

第三、将制备的第一试纸条、第二试纸条和第三试纸条放置在具有三个检测视窗的壳体内，即完成；

步骤A中还包括首先制备量子点标记的嗜肺军团菌血清1型抗体、量子点标记的肺炎支原体抗体、量子点标记的Q热立克次体抗体的混合物，具体方法包括以下操作步骤：

a：在胶乳颗粒悬浊液中加入改性环糊精，混匀24小时，纯化，得改性环糊精-胶乳复合物悬浊液；

b：在步骤a制备的改性环糊精-胶乳复合物悬浊液中加入量子点，混匀24小时，纯化，得量子点-改性环糊精-胶乳复合物悬浊液；

c：在步骤b制备的量子点-改性环糊精-胶乳复合物悬浊液中加入活化剂，活化15分钟，纯化，之后加入嗜肺军团菌血清1型抗体，混匀2～4小时后，离心得沉淀物颗粒，将沉淀物颗粒用封闭液重悬，室温混匀1小时，之后再进行纯化，即得量子点标记的嗜肺军团菌血清1型抗体；

d：按照上述步骤a～c同样的方法制备量子点标记的肺炎支原体抗体、量子点标记的Q热立克次体抗体，然后将量子点标记的嗜肺军团菌血清1型抗体、量子点标记的肺炎支原体抗体和量子点标记的Q热立克次体抗体混合，备用。

2.如权利要求1所述的九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，所述改性环糊精为羧甲基化改性环糊精或氨基化改性环糊精。

3.如权利要求1所述的九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤a中所述改性环糊精与胶乳颗粒的质量比为20：1；步骤b中所述量子点与改性环糊精-乳胶复合物的质量比为10：1；步骤c中所述嗜肺军团菌血清1型抗体与量子点-改性环糊精-胶乳复合物的质量比为1：20。