[发明专利]一种九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测用免疫层析试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫层析检测技术领域，具体涉及一种九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测用免疫层析试剂盒及其制备方法。

背景技术

呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染，上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染(acute upper respir tract infection)，指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称，是呼吸道最常见的一种传染病，常见病因为病毒，少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区，不仅具有较强的传染性，而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等，由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。已报道的非典型呼吸道病原体有很多，最常见的有嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒等。

嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP)是一种兼性细胞内致病菌，有鞭毛，革兰氏阴性，军团菌科军团菌属多形态性的短小球杆菌。其不抗酸，无孢子，无荚膜，类似于杆菌。不能分解明胶、糖类或是尿素，同时，不可参加酵解反应。嗜肺军团菌无色，也非自身荧光，氧化酶与过氧化氢酶测试阳性，β-内酰胺酶阳性。专性需氧，在自然界可长期存活，如在蒸馏水中可存活100d以上，污水中可存活一年，对热和一般消毒剂敏感。菌落特征为灰白色，有光泽，湿润，圆形，凸起，并有特殊臭味，革兰氏染色不明显，多用镀银法或Giemsa法染色。广泛分布于天然淡水环境或人工水域中，在阿米巴体内寄生，亦可感染人巨噬细胞，在其胞内繁殖和杀死人巨噬细胞，是引起军团菌病(军团菌肺炎)的重要病原体。军团菌病在国内外时有爆发流行，中央空调冷凝塔水系统是引起军团菌病的主要传染源，病死率较高。目前已知军团菌有48个种70多个血清型，其中嗜肺军团菌有15个血清型，血清型-1是引起社区获得性肺炎和院内感染性肺炎的重要病原体。通常军团病的爆发时间是在仲夏和初秋，易发生在封闭式中央空调房间里。军团菌的易感人群通常为老年人、吸烟者和有慢性肺部疾患者；同时，免疫功能低下，如癌症病人、肾透析病人和艾滋病人也特别易感。它的症状类似于肺炎，表现为发冷、不适、肌痛、头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。90％以上的患者体温迅速上升，咳嗽并伴有粘痰，偶尔出现伴有腹泻呕吐的胃肠道紊乱，重症病人可发生肝功能变化及肾衰竭。由于其非典型症状，其诊断主要依靠实验室诊断。

肺炎支原体，曾名为类胸膜肺炎微生物(PPLO)，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞壁的病原体，可通过细菌滤器，在琼脂培养基中生长时，需要含胆固醇的酵母浸出液及20％马血清，其菌落很小，很少超过0.5mm，肉眼不易观察，在显微镜下菌落呈圆形均匀的颗粒状，外围有透明带，MP呈球形，杆状和丝状等多种形态，仅有由三层膜组成的胞浆膜，革兰染色呈阴性，胞质内含核糖体和双股DNA，在有氧或无氧条件下生长较其他支原体为慢，接种后5～10天才能见到，能发酵葡萄糖产生乳酸，能产生过氧化酶类溶血素。肺炎支原体对呼吸道上皮细胞有特殊的亲和力，对青霉素耐药，对红霉素等大环内酯类抗生素极为敏感。肺炎支原体感染主要通过呼吸道飞沫传播，平时多为散发病例，全年均可发病，以冬季较多。约每隔3～7年发生一次地区性流行。学龄儿童患病较多，学龄前儿童包括婴幼儿也可发生肺炎支原体感染。其发病机制主要由于支原体穿过宿主呼吸道黏膜表面的黏液纤毛层，黏附于黏膜上皮细胞上，此黏附作用与肺炎支原体表面的P1蛋白的末端结构有关，当此黏附因子附着于呼吸道黏膜上皮细胞时，释放的有毒代谢产物可导致纤毛运动减弱，细胞损伤。其病症主要为支气管炎，毛细支气管炎及间质性肺炎，管壁水肿，增厚，有浸润斑，支气管及细支气管内有黏液甚至脓性分泌物，镜下所示为急性细支气管炎伴有间质性肺炎，肺泡内可见有少量水肿液及巨噬细胞，细支气管壁有水肿，充血以及单核细胞和淋巴细胞浸润，腔内可见到中性粒细胞，脱落上皮细胞及细胞残片，附近的肺泡间隔内有淋巴细胞及单核细胞浸润，重症可见弥漫性肺泡坏死和透明膜病变。要确诊是否为肺炎支原体感染，要到医院去检测血中肺炎支原体抗体，特异性IgM、IgG抗体检测和聚合酶链反应检测是目前公认的确诊标准之一，抗体滴定度>1:40(+)是诊断肺炎支原体感染的客观证据。