[发明专利]一种林可链霉菌发酵生产林可霉素的培养基和培养方法

权利要求书

1.一种林可链霉菌发酵生产林可霉素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于所述

一级种子培养基组成为：

小麦麸皮14-18g/L、麦芽糖6-10g/L、蚯蚓粉3-7g/L、丝素粉4-8g/L、玉米浆7-12ml/L、生物素0.08-0.12g/L、尿素0.04-0.8g/L、轻质碳酸钙1-5g/L、麦芽糖酶0.001-0.005g/L；

二级种子培养基组成为：

小麦麸皮20-24g/L、麦芽糖9-13g/L、蚯蚓粉6-10g/L、丝素粉8-12g/L、干酪素7-11g/L、玉米浆10-14ml/L、生物素0.1-0.14g/L、尿素0.07-0.11g/L、轻质碳酸钙2-6g/L、麦芽糖酶0.001-0.005g/L；

发酵培养基组成为：

小麦麸皮20-24g/L、麦芽糖9-13g/L、蚯蚓粉6-10g/L、丝素粉8-12g/L干酪素7-11g/L、玉米浆10-14ml/L、生物素0.1-0.14g/L、尿素0.07-0.11g/L、轻质碳酸钙2-6g/L、麦芽糖酶0.001-0.005g/L、硫酸锌0.09-0.13g/L、硫酸镁0.02-0.06g/L、聚乙二醇辛基苯基醚0.003-0.007g/L、磷酸二氢钾0.008-0.012g/L。

2.一种利用权利要求1所述培养基生产林可霉素的培养方法，其特征在于其工艺步骤为：

1） 一级种子培养：首先将一级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后在火焰保护下，将已经培养好的林可链霉菌母瓶发酵液接入一级种子培养基中进行培养，接种量控制在1.6L-2L/m3；至菌体浓度20-25%、pH值7.5-8.5、培养时间30-35h时移种；

2） 二级种子培养：先将二级种子培养基灭菌，冷却至25-30℃，并用无菌空气保压，将培养好的一级种子液移入二级种子培养基中进行二级种子培养，移种比例控制在9-11%，温度控制在29-30℃，至菌体浓度30-35%、pH值7.5-8.5、培养时间17-21h时移种；

3）发酵培养：先将发酵培养基灭菌，冷却至20-25℃，并用无菌空气保压，然后将培养好的二级种子液移入发酵培养基进行发酵培养，移种比例控制在9-11%，至菌体浓度35-40%、化学效价＞11000u/mL、pH：7.6-8.0、培养时间145-150h时终止发酵。

3.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述培养好的林可链霉菌母瓶发酵液质量要求为：菌体浓度20-30%；镜检无杂菌；摇瓶发酵单位4500u/ml以上。

4.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述一级种子培养条件为：罐压0.03-0.05MPa；罐温29-30℃；空气流量：0-4h，采用空气搅拌代替机械搅拌；5h-移种：50-60m³/h；搅拌转速50-60r/min。

5.按照权利要求2所述的培养方法，其特征是在于所述二级种子培养条件为：罐压0.03-0.05MPa；罐温29-30℃；空气流量：0-10h，40-50m³/h；11h-移种：50-60m³/h；搅拌转速70-80r/min。