[发明专利]测定鸡肉中抗病毒药物残留的UPLC‑MS/MS方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析化学、食品安全领域，尤其涉及一种能测定鸡肉中抗病毒药物残留的UPLC-MS/MS方法。

背景技术

抗病毒药物是一类用于预防和治疗病毒感染的药物，在体外可制止病毒复制酶，在动物体或感染细胞中可阻止病毒的复制或繁殖，是临床上治疗病毒病极其有效的药物。随着我国畜禽饲养集约化水平提高，传染病的发生与流行已成为阻碍我国畜禽业快速发展的重要因素，因病毒感染导致动物死亡的比率仅次于细菌感染的致死率，占36.8％，所以抗病毒药物被大量使用于畜禽产品生产中，常常导致畜禽产品抗病毒类药物残留超标现象。人体经常摄入低剂量的药物残留物，会逐渐在体内蓄积而导致部分器官病变。鉴于抗病毒药物残留的危害，抗病毒类药物已成为我国畜禽产品普查及风险监测的重点内容。

属于核苷类的阿昔洛韦、更昔洛韦、奥司他韦、扎那米韦、拉米夫定、利巴韦林，非核苷类的阿比朵尔、吗啉胍，属于三环胺类的金刚烷胺、金刚乙胺、美金刚及非核苷类异环胺类小分子免疫反应调节剂咪喹莫特是在畜禽饲养中常用且易被滥用的抗病毒药物。这些抗病毒药物种类繁多、性质差异较大、在动物组织中的结合形态不同，是药物多残留分析的难点。目前的检测抗病毒药物多残留的方法主要有光谱法、电位滴定法、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)等，但这些方法多用于单一兽药残留检测或局限于化合物性质相同的同类抗病毒药物多残留检测。因此，有必要发明一种能同时检测差异较大多类抗病毒药物的测定方法。

液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)因具有高灵敏度和高选择性的优势，已成为复杂的动物组织样品中多类兽药残留同步检测的主流方法，中国专利(CN 105319292 A)公开了一种分析动物性食品中四类29种限用兽药残留的UPLC-MS/MS方法，能同时检测鸡肉、鸡肝、猪肉和猪肝样品中四环素类、金刚烷胺、磺胺类和喹诺酮类四类29种限用兽药。但未见同时检测核苷类、非核苷类、三环胺类及非核苷类异环胺类的相关报道。此外，已报道的方法多采用液液萃取和固相萃取柱净化，其中液液萃取存在种类有限、基质干扰大等缺点，而固相萃取小柱(SPE)净化方式存在成本高、适用范围小等缺点。而QuEChERS方法简洁、快速、稳定性高，已被普遍用于蔬菜、水果、水产品等农药、兽药残留的检测，但对易受到抗病毒药物感染的禽类检测暂无报道。

因此，有必要发明一种操作简单且能同时快速检测鸡肉中核苷类、非核苷类、三环胺类及非核苷类异环胺类四类抗病毒药物残留的方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种能同时检测鸡肉中属于核苷类的阿昔洛韦、更昔洛韦、奥司他韦、扎那米韦、拉米夫定、利巴韦林，非核苷类的阿比朵尔、吗啉胍，属于三环胺类的金刚烷胺、金刚乙胺、美金刚及非核苷类异环胺类小分子免疫反应调节剂咪喹莫特四类12种抗病毒类药物残留的方法，同时，该方法操作简单，节约了检测时间，提高了检测效率，降低了检测成本及有机溶剂使用量。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：提供一种测定鸡肉中抗病毒药物残留的UPLC-MS/MS方法，包括QuEChERS方法进行样品前处理及样品的检测分析，所述样品前处理包括样品的提取及净化，所述样品的提取为结合态样品在酸性条件下酶解后于盐酸-甲醇混合液中提取，所述样品的净化为经无水硫酸钠脱水后、采用C18粉、PSA粉吸附剂对所述提取液进行分散固相萃取净化。

本发明的有益效果在于：通过改进样品的提取、净化方法及色谱-质谱条件，从而实现同时快速测定鸡肉中化合物性质差异大的四类12种抗病毒药物残留量，简化了操作步骤，节约了检测时间，提高了检测效率，降低了检测成本及有机溶剂使用量。

附图说明

图1为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标阿昔洛韦b样品MRM图；

图2为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标更昔洛韦b样品MRM图；

图3为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标扎那米韦b样品MRM图；

图4为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标拉米夫定b样品MRM图；

图5为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标阿比朵尔b样品MRM图；

图6为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标奥司他韦b样品MRM图；

图7为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标咪喹莫特b样品MRM图；

图8为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标吗啉胍b样品MRM图；

图9为本发明实施例中鸡肉空白样品a与加标金刚烷胺b样品MRM图；