[发明专利]一种辛可耐因Ib的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种辛可耐因Ib的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

1)提供粗提物，常温下将所述粗提物溶于水中得到粗提物水溶液；其中，所述粗提物为植物的根、果实、茎和/或叶的醇提物，所述植物选自蔷薇科植物、红树科植物、葡萄科葡萄属植物和菝契科植物中的一种或多种；

2)将所述粗提物水溶液经HP20型大孔树脂吸附，然后以乙醇水溶液梯度洗脱，收集富含辛可耐因Ib的洗脱液，合并所述洗脱液，减压浓缩，得辛可耐因Ib的初级富集物；

3)将步骤2)得到的初级富集物溶于等质量的甲醇，得到初级富集物的甲醇溶液，将所述初级富集物的甲醇溶液与60～100目的硅胶粉混合，减压拌样至干，干法上样，以二氯甲烷-甲醇为洗脱液过硅胶色谱柱梯度洗脱分离，收集并合并富含辛可耐因Ib的洗脱液，减压浓缩至干，得辛可耐因Ib的次级富集物；其中，所述硅胶粉的质量为所述初级富集物质量的1.5～2.5倍；所述硅胶色谱柱中硅胶质量为所述初级富集物质量的10～20倍；

4)将所述次级富集物溶解于2倍质量的水中得到次级富集物的水溶液，将所述次级富集物的水溶液以甲醇水溶液为梯度洗脱液通过大孔聚合物填料色谱柱分离，收集并合并富含辛可耐因Ib的洗脱液，减压浓缩至干，得辛可耐因Ib的三级富集物；所述大孔聚合物填料色谱柱为Toyopearl HW-40柱；

5)将4)得到的三级富集物以50％甲醇水溶液为洗脱液通过C18柱精制，在254nm检测收集辛可耐因Ib的色谱峰，收集洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥得到辛可耐因Ib；所述C18柱为Cosmosil ODS柱。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中将所述粗提物以质量比1：10的比例溶于水中。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蔷薇科植物为苹果属植物。

4.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，所述粗提物为苹果多酚。

5.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤2)中梯度洗脱的顺序为水、体积百分比浓度分别为10％、30％、50％、70％、95％的乙醇水溶液。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2)中每半个柱床体积作为一个接收体积检测洗脱样品。

7.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤3)中所述梯度洗脱的二氯甲烷-甲醇体积比梯度依次为95:5、93:7、92:8、91:10。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤3)中每半个柱床体积作为一个接收体积检测洗脱样品。

9.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤4)中所述梯度洗脱的甲醇水溶液中甲醇与水的体积比梯度依次为10％、15％、20％、25％。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤4)中每四分之一个柱床体积作为一个接收体积检测洗脱样品。

11.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤1)～5)中通过薄层层析方法并结合分析型HPLC检测洗脱样品是否含有辛可耐因Ib。

12.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤1)～5)中减压浓缩的条件为温度≤60℃，真空度为0.06～0.08Mpa。