[发明专利]一种褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法

权利要求书

1.一种褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法，其特征在于：包括，

二级种子液培养：将所述褐色喜热裂孢菌在加富培养基中50～55℃、200～240 r/min条件下培养20～24h，制得一级种子液，以2～3％的接种量将一级种子液转 接在加富培养基中，在50～55℃、200～240r/min条件下培养20～24h制得二级种 子液；

几丁质酶的制得：以2～3％的接种量将二级种子液接入发酵培养基中，在 50～55℃、200～240r/min条件下培养50～54h，得到几丁质酶产品。

2.如权利要求1所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法，其特征 在于：所述加富培养基以质量百分比计，包括，NaCl1.00～1.40％、(NH₄) ₂SO₄2.40～2.60％、KH₂PO₄0.65～0.80％、Na₂HPO₄7.00～7.50％、EDTA0.01～0.03％、 MgSO₄·7H₂O0.05～0.10％、FeSO₄·7H₂O0.005～0.010％、MnSO₄·7H₂O0.005～0.007％、 CaCl₂·2H₂O0.003～0.007％、生物素0.00007～0.00010％、硫铵素0.00007～0.00010％、 酵母粉0.010～0.020％。

3.如权利要求2所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法，其特征 在于：所述加富培养基，其碳源包括纤维二糖、葡萄糖或木聚糖中的一种或几 种。

4.如权利要求1～3中任一项所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方 法，其特征在于：所述加富培养基，其pH为6.0～8.0。

5.如权利要求1所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法，其特征 在于：所述发酵培养基以质量百分比计，包括，NaCl1.00～1.40％、(NH₄) ₂SO₄2.40～2.60％、KH₂PO₄0.65～0.80％、Na₂HPO₄7.00～7.50％、EDTA0.01～0.03％、 MgSO₄·7H₂O0.05～0.10％、FeSO₄·7H₂O0.005～0.010％、MnSO₄·7H₂O0.005～0.007％、 CaCl₂·2H₂O0.003～0.007％、生物素0.00007～0.00010％、硫铵素0.00007～0.00010％、 酵母粉0.010～0.020％。

6.如权利要求5所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法，其特征 在于：所述发酵培养基，其碳源包括纤维二糖、几丁质、葡萄糖或木聚糖中的 一种或几种。

7.如权利要求1、5、6中任一项所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶 的方法，其特征在于：所述发酵培养基，其pH为6.0～8.0。

8.如权利要求6所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法，其特征 在于：所述碳源为几丁质，且几丁质的含量为5g/L。

9.如权利要求8所述的褐色喜热裂孢菌发酵生产几丁质酶的方法，其特征 在于：所述几丁质酶产品发挥最佳作用时的pH为5.0～7.0，且50～55℃仍具有酶 活。

10.如权利要求1、8、9中任一项所述的褐色喜热裂孢菌生产几丁质酶的方 法，其特征在于：所述几丁质酶产品最佳反应时间为5～10min。