[发明专利]从鱼类的精液分离多脱氧核糖核苷酸的方法、由所述方法获得的多脱氧核糖核苷酸及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种从鱼类的精液分离多脱氧核糖核苷酸(polydeoxyribonucleotide；PDRN)的方法、根据所述方法而获得的PDRN及其用途。

背景技术

PDRN作为存在于生物体内的组织再生活性物质，由50个至2000个之间的碱基对结合成链状的脱氧核苷酸聚合物(deoxyribonucleotides polymers)的混合物构成。所述PDRN在欧洲等地被许可为医药品，用于伤口治愈及美容。具体而言，当将所述PDRN应用于临床时，表现出伤口治疗时间缩短和正常组织化作用以及糖尿病性足部溃疡的迅速伤口闭合作用，已知对痤疮及褥疮、伤口治愈、疤痕疾病、细丝纹、皮肤老化、日晒老化、改善皮肤弹力、整形手术后快速治愈、脱发、改善血液循环等有效。另外，所述PDRN具有亲水性特性，不引起过敏反应或体内排异反应，由于抗热性，不因高温灭菌而破坏，保持活性，因而非常容易应用于再生医学领域中使用的医药品领域及化妆品领域等多样的产业领域。

作为利用所述PDRN的以往技术，专利文献1(韩国公开专利公报第10-2014-0030605号)对将PDRN与牙齿一同构成从而提高牙槽骨再生速度的牙槽骨再生用试剂盒(kit)进行了记载，专利文献2(韩国公开专利公报第10-2015-0068647号)对含有微粒化PDRN的滴眼剂组合物进行了记载，专利文献3(韩国注册专利公报第10-1590498号)对包含芦荟提取物及PDRN的化妆品组合物进行了记载。

以往，PDRN主要是通过降低从鲑鱼或鳟鱼的精巢或精液分离的DNA的分子量的过程而制造的，这种用于获得PDRN的DNA分离法是基于曾应用于哺乳类等其它物种的技术发展而来的。具体而言，以往作为从鱼类的组织分离DNA的方法，一般使用包含使用苯酚和三氯甲烷的过程的DNA分离方法。

例如，在非专利文献1(Taggart,J.B,.et al.,J.Fish Biol.1992,40,963-65.)中，记载了使用苯酚/三氯甲烷/异戊醇(phenol/chloroform/isoamylalcohol)从鲑鱼科鱼类的骨骼肌、肝脏、鳍组织提取DNA的方法。但是，所述方法存在如下问题：即，为了回收DNA，不仅需要过多的步骤和时间，而且存在使用有害于人体的苯酚和三氯甲烷。另外，所述方法需要使用昂贵的化学物质或器具，因而在大量生产体制下，在费用方面存在不够有效的问题。

作为解决这种问题的以往方法，专利文献4(韩国公开专利公报第10-2009-0079413号)记载有，在通过酶分解、灭菌及分子量降低工序而制造特定分子量范围的DNA聚合物片断方面，在中性的pH下执行酶分解工序，从而以更环保、安全的方法获得DNA聚合物片断复合体。但是，即便是专利文献4，其在分子量降低工序时，为了匹配pH而使用盐酸和醋酸，因而不能说是100％安全、环保的方法，另外，在获得令人满意的高纯度DNA聚合物片断复合体方面也存在局限。

【现有技术文献】

【专利文献】

(专利文献1)KR1020140030605 A

(专利文献2)KR1020150068647 A

(专利文献3)KR101590498 B

(专利文献4)KR1020090079413 A

【非专利文献】

(非专利文献1)Taggart J.B.et al.,J.Fish Biol.1992,40,963-965.

发明内容

技术问题

本发明要提供一种从鱼类的精液分离PDRN的方法，本发明使用蛋白质分解酶及饱和氯化钠代替诸如苯酚或三氯甲烷的有机溶剂来分离DNA，作为所述DNA的破碎方法，利用诸如超声波分解法等的物理方法，从而以高效、低费用且无毒性的安全的方法，从鱼类的精液分离PDRN。

另外，本发明想要提供一种根据所述方法而获得的高纯度的PDRN及利用其制造的医药品及化妆品。

解决问题的方案