[发明专利]通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法

权利要求书

1.一种通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的方法，其特征在于，该方法的色谱条件为采用以表面涂敷有纤维素-三(4-氯-3-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填料的手性色谱柱，以添加碱性试剂的甲醇-乙醇混合溶液作为流动相，所述甲醇-乙醇体积比为30:70～50:50，所述碱性试剂与甲醇-乙醇混合溶液的体积比为0.05％～0.5％；所述异构体杂质Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的结构如下：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述手性色谱柱为DAICEL CHIRALCEL OXH手性色谱柱。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碱性添加剂为二乙胺、丁胺或乙醇胺。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，该方法包括如下步骤：

1)系统适用性溶液的制备：取依度沙班对照品、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，加流动相溶解并制成三者的混合溶液，其中依度沙班浓度为0.01mg/mll～2mg/ml，Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的浓度分别为依度沙班浓度的0.5％～1％，即得；

2)供试品溶液：取依度沙班供试品适量，加流动相溶解并稀释制成0.01mg/ml～2mg/ml的溶液，即得；

3)对照溶液：精密量取供试品溶液0.1ml～1.0ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得；

4)色谱条件：采用以表面涂敷有纤维素-三(4-氯-3-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填料的手性色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相为甲醇-乙醇-二乙胺40:60:0.3；检测波长为：210nm～310nm；流速为0.5ml/min～1.0ml/min；柱温为：0℃～40℃；

5)甲苯磺酸依度沙班水合物的异构体测定：精密量取上述供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照主成分自身对照法计算样品中异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的量。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤4)中的检测波长为290nm。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤4)中的流速为1ml/min。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤4)中的柱温为35℃。