[发明专利]一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒及测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及糖化血红蛋白测定领域，具体的，本发明涉及一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒及测定方法

背景技术

糖化血红蛋白(即HbA1c)，是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。一般临床上使用糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比作为衡量糖化血红蛋白含量是否正常的指标。糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比可以稳定可靠的反应出检测前4个月的平均血糖水平，且这种检测不会受到抽血时间，是否空腹，是否使用胰岛素等因素干扰，是国际上糖尿病监控的“金标准”。

现有技术中，为了得到糖化血红蛋白的比例，往往需要分别检测总血红蛋白和糖化血红蛋白的含量，再进行计算得出糖化血红蛋白的比例。而目前主要的血红蛋白检测方法有：高效液相色谱法、硼酸亲和层析法、离子交换层析法、免疫比浊法、酶法。然而，高效液相色谱法、硼酸亲和层析法以及离子交换层析需要使用专业的大型仪器，且仪器价格昂贵，其实际应用并不便捷；同时，免疫比浊法需要使用大量抗体，且需要使用大型生化分析仪器才能进行检测，也无法实现小型化，便捷化的检测；同样的，酶法也需要使用多种酶配合进行反应，并经过大型生化分析仪仪器进行检测，才能得到最终结果。

为了解决无法实现小型化、便捷化测定糖化血红蛋白比例的问题，现有技术中也进行了一定的尝试与实验。例如现有技术(CN101915849A，公开日：2010年12月25日)就公开了一种便捷化测定糖化血红蛋白的方法，其包括如下步骤：a.将全血样本与溶血液混合均匀；b.取适量溶血后的样本加入悬浮在甘氨酸缓冲液中的乳胶；c.经预定时间后再分别加入抗体B试剂及抗体A试剂；d.混合均匀后在单波长光照射条件下,通过特定蛋白分析仪读取散射值；e.最后根据散射值从标准曲线图中读取糖化血红蛋白的百分比。

然而，这种方法仍然存在不便之处，例如其检测过程中，需要额外加入较大量的抗体A和抗体B试剂，这不仅提高了检测成本，同时由于需要额外加入抗体试剂，所以也进一步带来了抗体试剂运输和储存的问题；进一步的，单波长光照检测和蛋白分析仪读取都需要价格较为昂贵的设备，其操作也较为繁琐，需要进行大量的培训以保证检测结果准确，而这也进一步提高了检测的成本和不便捷性。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于，提供一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本发明试剂盒中，本发明提供了一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本发明试剂盒中，通过将抗体和二抗包被于试纸上，并通过使用荧光颗粒为标记检测物，从而可以通过将待测样本与荧光颗粒一次混合后，直接采用层析的方法将糖化血红蛋白在试纸上分离得到，并进一步通过荧光层析读数仪直接对照检测得到样本中糖化血红蛋白比例。而这也同时解决了现有技术中需要多仪器配合使用所带来的操作不便捷的技术问题。本发明试剂盒具有成分结构稳定，检测便捷，操作方便，结果准确等优点。

本发明的第二个目的在于，提供一种测定糖化血红蛋白比例的方法。本发明方法中，通过使用本发明试剂盒进行检测，因而可以解决现有技术中方法由于特异性抗体储存运输以及大量使用所带来的操作不便捷等技术问题，也可以解决现有技术中检测需要多仪器配合使用所带来的操作不方便的技术问题。本发明方法具有操作便捷，检测方法简单，检测结果准确等优点。

为了实现本发明上述目的，本申请特采用如下技术方案：

一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，所述试剂盒包括试剂瓶和试纸。其中，所述试剂瓶中装有可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的荧光颗粒或彩色颗粒；其中，所述试纸由一端起，依次为冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区、检测区、对照区以及吸水区。进一步的，所述糖化血红蛋白抗体结合区包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区包被有抗血红蛋白抗体。

本发明中，通过使用荧光颗粒为标记检测物，并通过将荧光颗粒与样本一次混合后，并通过在试纸上将糖化血红蛋白固定分离，并通过检测荧光度数即能够实现糖化血红蛋白比例的测定，具有检测方法便捷准确的优点。

可选的，本发明中，所述二抗为羊抗鼠抗体。

可选的，本发明中，所述荧光颗粒或彩色颗粒为具有疏水性表面的聚合物荧光颗粒/彩色微球；或荧光无机颗粒/彩色微球，也可以是表面具有环氧基，氯甲基，甲苯磺酰基，醛基等高活性基团可以和蛋白进行反应的荧光/彩色微球。