[发明专利]利用酶辅助络合萃取法从长春花中提取分离长春质碱的方法

权利要求书

1.利用酶辅助络合萃取法从长春花中提取分离长春质碱的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)酶辅助超声提取

取长春花地上部分阴干并粉碎，得到长春花干粉，加入混合酶液孵化，过滤，留长春花粉末，在长春花粉末中加入乙醇，并用盐酸调节pH至5.6-6.8，超声提取；过滤，留提取液，将提取液减压浓缩，得到浓缩液；

(2)络合萃取富集

以二(2-乙基己基)磷酸作为络合剂，石油醚作为稀释剂，组成萃取体系，对浓缩液进行络合萃取，分离上层液，得到富含长春质碱的萃取液；

(3)反萃分离

将富含长春质碱的萃取液用稀盐酸反萃，稀盐酸层减压浓缩后，冷冻干燥，得到长春质碱粗品；

(4)纯化

将所得的长春质碱粗品进行重结晶，即得；

步骤(1)中的混合酶液包括：纤维素酶3-6U/mL、果胶酶4-8U/mL和半纤维素酶6-9U/mL；

步骤(1)中的混合酶液pH为4.0-7.0，混合酶液中还包括金属离子Fe²⁺、Co²⁺、Mn²⁺、Ca²⁺中的一种或多种，金属离子的总质量分数为1％；

步骤(4)长春质碱粗品进行重结晶的具体方法为：将长春质碱粗品用超纯水溶解，用氨水将pH调至8-9后，在20-25℃下搅拌5-6h，然后静置12-24h，即得；

步骤(4)中长春质碱粗品用超纯水溶解至终浓度为4-6g/L。

2.根据权利要求1所述的利用酶辅助络合萃取法从长春花中提取分离长春质碱的方法，其特征在于，所述孵化的温度为25-50℃，时间为4-6h。

3.根据权利要求1所述的利用酶辅助络合萃取法从长春花中提取分离长春质碱的方法，其特征在于，所述乙醇的加入量为5倍过滤得到的长春花粉末的重量，乙醇的体积分数为70-80％。

4.根据权利要求1所述的利用酶辅助络合萃取法从长春花中提取分离长春质碱的方法，其特征在于，步骤(1)中超声提取3-4次，每次4-6h。

5.根据权利要求1所述的利用酶辅助络合萃取法从长春花中提取分离长春质碱的方法，其特征在于，步骤(2)中二(2-乙基己基)磷酸和石油醚的体积比为1:1-3，萃取体系和浓缩液的体积比为1-3:1，萃取次数为3-5次。

6.根据权利要求1所述的利用酶辅助络合萃取法从长春花中提取分离长春质碱的方法， 其特征在于，步骤(3)中稀盐酸的质量分数为1-3％，稀盐酸与萃取液的体积比为1-3:1，反萃次数为3-5次。