[发明专利]一种建立葵花盘HPLC标准指纹图谱的方法

权利要求书

1.一种建立葵花盘HPLC标准指纹图谱的方法，其特征在于：包括采用HPLC方法对5-15批次葵花盘的提取物进行检测获得指纹图谱的步骤；

所述HPLC方法以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填充剂，以乙腈为流动相A相，0.2％-0.6％磷酸水溶液为流动相B相，按如下条件进行梯度洗脱：

所述葵花盘的提取物通过如下方法提取得到：用水提取葵花盘，用乙醇沉淀所得的提取液，取上清液浓缩成稠膏，干燥，粉碎，即得；

所述HPLC方法采用紫外检测器，检测波长为320-330nm；流速为0.8-1.2mL/min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述葵花盘的提取物通过如下方法提取得到：粉碎葵花盘至粒径为0.5-1.5cm，加入相当于葵花盘重量8-10倍的水，提取2-4次，每次1-3h，浓缩提取液，向所得浓缩液中加入乙醇沉淀，离心，取上清液，除去乙醇浓缩成稠膏，干燥，粉碎，即得。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述加入乙醇使其在溶液中的体积百分含量为60-70％。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于：所述HPLC方法中柱温为28-32℃。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：称取5-15批次葵花盘的提取物，分别以甲醇为溶剂，配制成浓度为10-50mg/mL的供试品溶液；

(2)HPLC测定：采用如下HPLC方法对5-15个所述供试品溶液进行检测，得到指纹图谱；

以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填充剂，以乙腈为流动相A相，0.4％磷酸水溶液为流动相B相，按如下条件进行梯度洗脱；紫外检测波长为327nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃；

(3)标准指纹图谱的建立：采用软件对步骤(2)的指纹图谱进行分析，得到葵花盘的标准指纹图谱。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述软件为中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述批次的数量为10个。

8.权利要求1-7任一项所述的方法建立得到的葵花盘HPLC标准指纹图谱，其特征在于，所述葵花盘HPLC标准指纹图谱由9个共有峰构成，按照保留时间由小到大排序，各共有峰与第7个保留时间对应的峰的相对保留时间分别为：第1号峰：0.16±5％；第2号峰：0.21±5％；第3号峰：0.29±5％；第4号峰：0.52±5％；第5号峰：0.55±5％；第6号峰：0.79±5％；第7号峰：1.00；第8号峰：1.21±5％；第9号峰：1.28±5％。

9.根据权利要求8所述的葵花盘HPLC标准指纹图谱，其特征在于：所述第7号峰对应的物质为绿原酸。