[发明专利]热稳定性提高的酸性淀粉酶突变体及其制备方法和应用有效
申请号: | 201610542505.X | 申请日: | 2016-07-11 |
公开(公告)号: | CN107603965B | 公开(公告)日: | 2020-07-31 |
发明(设计)人: | 蔡孟浩;高燕云;周祥山;张元兴 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N9/28 | 分类号: | C12N9/28;C12P19/14;C12P19/02 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 热稳定性 提高 酸性 淀粉酶 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.具有热稳定性的淀粉酶突变体,其特征在于,所述的淀粉酶突变体基于深海嗜热菌来源的淀粉酶成熟肽,第181位和第182位氨基酸缺失;并且,第463位突变为甘氨酸,或第363位突变为苏氨酸;其中所述淀粉酶成熟肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.分离的多核苷酸,其特征在于,所述的核苷酸编码权利要求1所述的淀粉酶突变体。
3.表达载体,其特征在于,其含有权利要求2所述的多核苷酸。
4.遗传工程化的宿主细胞,其特征在于,它含有权利要求3所述的载体,或其基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。
5.权利要求1所述的多肽的制备方法,其特征在于,该方法包含:
(i)培养权利要求4所述的宿主细胞,使之表达权利要求1所述的淀粉酶突变体;
(ii)收集含有权利要求1所述的淀粉酶突变体的培养物;和
(iii)从培养物中分离出权利要求1所述的淀粉酶突变体。
6.权利要求1所述的淀粉酶突变体或权利要求4所述的宿主细胞的培养物的用途,用于水解糖苷键或用于形成简单糖。
7.如权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的淀粉酶突变体用于水解α-1,4糖苷键。
8.如权利要求7所述的用途,其特征在于,所述的淀粉酶突变体用于水解淀粉或糖原中的α-1,4糖苷键。
9.用于水解糖苷键或用于形成简单糖组合物,其特征在于,它含有:
(a)权利要求1所述的淀粉酶突变体或含有权利要求4所述宿主细胞的培养物;以及
(b)食品学或工业上可接受的载体。
10.一种水解糖苷键或形成简单糖的方法,其特征在于,该方法包含:用权利要求1所述的淀粉酶突变体处理待水解的底物。
11.如权利要求10所述的方法,其特征在于,在pH4.5~7.5条件下,用所述的淀粉酶突变体处理待水解的底物;和/或
在温度50-90℃条件下,用权利要求1所述的多肽处理待水解的底物。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,在pH5~7条件下,用所述的淀粉酶突变体处理待水解的底物。
13.如权利要求11所述的方法,其特征在于,在温度60-80℃条件下,用权利要求1所述的多肽处理待水解的底物。
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