[发明专利]一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法

权利要求书

1.一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，测定的六种环烯醚萜苷类成分分别是马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷和开联番木鳖苷二甲基乙缩醛，测定步骤如下：

（1）取出连花清瘟胶囊中药粉，称取一定量药粉待用；

（2）向步骤（1）中的药粉中加入提取溶剂，摇匀后进行超声提取得上清液；

（3）向步骤（2）中的上清液中加入净化剂，涡流振荡；

（4）经步骤（3）处理后的上清液用微孔滤膜过滤得提取液；

（5）分别精密称取马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷、开联番木鳖苷二甲基乙缩醛对照品，加甲醇溶解，制成混合标准溶液；使用时，按一定比例逐级稀释，待用；

（6）将步骤（4）得到的提取液进行高效液相色谱分析，色谱条件如下：色谱柱：Kromasil C₁₈，4.6×250 mm，5μm；流速：0.5-1.0mL/min；检测波长：200-250nm；柱温：25-30℃；流动相：0.4%甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脱；

（7）以外标法进行连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的定量分析，即以已知浓度的环烯醚萜苷类的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，对提取液进行测定，测得检出提取液中六种环烯醚萜苷类成分的色谱峰面积，代入标准曲线，求得连花清瘟胶囊中马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷和开联番木鳖苷二甲基乙缩醛的含量；

其中，所述步骤（6）中梯度洗脱程序如下：0～15 min，10%～14%乙腈；15～35 min，14%～25%乙腈；35～45 min，25%～50%乙腈；45～50 min，50%～100%乙腈；50～65 min，100%乙腈。

2.如权利要求1所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤（2）中提取溶剂为50%乙醇；所述药粉与提取溶剂的质量体积比1g:30-50ml。

3.如权利要求2所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述药粉与提取溶剂的质量体积比为1g:40ml。

4.如权利要求1所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤（2）中超声提取时间为0.5-2min。

5.如权利要求4所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，超声提取时间为1min。

6.如权利要求1所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤（3）中加入的净化剂为硅藻土和活性炭混合物。

7.如权利要求6所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述硅藻土和活性炭的质量比为90：10。

8.如权利要求1所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤（3）中所述净化剂与上清液的质量体积比为45-55 g:1ml。

9.如权利要求8所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述净化剂与上清液的质量体积比为50 g:1ml。

10.如权利要求1所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤（3）中涡流振荡时间为0.5-2 min。

11.如权利要求10所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述涡流振荡时间为1 min。

12.如权利要求1所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤（4）中微孔滤膜规格为0.22mm。

13.如权利要求1所述的一种同时测定连花清瘟胶囊中六种环烯醚萜苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤（6）中流速为0.8 mL/min；检测波长为240nm；柱温：25℃。