[发明专利]25‑羟基维生素D2和25‑羟基维生素D3高效液相色谱质谱联用法检测试剂盒

权利要求书

1.一种高效液相色谱质谱联用法检测试剂盒，其特征在于，包括：

(1)质控品，所述的质控品中含有25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3；

(2)同位素内标提取液，所述的同位素内标提取液中含有25-羟基维生素D2-d3和25-羟基维生素D3-d3；

(3)稀释液，所述的稀释液为乙腈；

(4)转化液，所述的转化液为PTAD(4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮)；

(5)复溶液，所述的复溶液为甲醇；

(6)流动相添加剂A，所述的流动相添加剂A为饱和一元羧酸；

(7)流动相添加剂B，其中所述的流动相添加剂B为C1-C3胺化合物。

2.根据权利1要求所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的流动相添加剂B为甲胺。

3.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元羧酸为甲酸、乙酸、丙酸、丁酸或其组合。

4.如权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元羧酸为甲酸。

5.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元羧酸为甲醇和乙醇之一或其组合。

6.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元羧酸为甲醇。

7.通过串联质谱法测定所取的生物样品中一种或多种二羟基维生素D代谢物的量的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(i)通过利用电喷雾离子源(ESI)对所述一种或多种羟基维生素D代谢物和内标进行电离，分别产生所述一种或多种羟基维生素D代谢物和所述内标的至少一种前体离子；

(ii)分别产生所述一种或多种羟基维生素D代谢物和所述内标的所述前体离子的一种或多种碎片离子；和

(iii)比较步骤(i)或(ii)或两者中产生的所述一种或多种羟基维生素D代谢物和所述内标的一种或多种所述离子的量以确定所述生物样品中的所述一种或多种羟基维生素D代谢物的量；

其中，色谱检测过程中的流动相中加入甲胺。

8.权利要求7的方法，其特征在于，所述一种或多种二羟基维生素D代谢物包括25-羟基维生素D2；并且其中所述25-羟基维生素D2的所述母离子的质/荷比为619.3±0.5。

9.权利要求7的方法，其特征在于，所述一种或多种二羟基维生素D代谢物包括25-羟基维生素D3；并且其中所述25-羟基维生素D3的所述母离子的质/荷比为607.3±0.5。

10.权利要求8或9的方法，其特征在于，其中所述一种或多种碎片离子包括选自质/荷比为298.3±0.5的离子的一种或多种离子。