[发明专利]基于LC‑MS/MS的胆汁和血清中16种胆汁酸的定量在审
| 申请号： | 201610554560.0 | 申请日： | 2016-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN107621502A | 公开（公告）日： | 2018-01-23 |
| 发明（设计）人： | 朱监宝;官培龙;郭孟磊 | 申请（专利权）人： | 上海可力梅塔生物医药科技有限公司;上海爱可赛默医疗器械有限公司;广州可力质谱医疗器械有限公司;江苏可力色质医疗器械有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司31266 | 代理人： | 崔佳佳,马莉华 |
| 地址： | 200433 上海市杨浦区翔殷路128号*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 lc ms 胆汁 血清 16 定量 | ||
1.一种基于LC-MS/MS的胆汁和血清中16种胆汁酸的定量检测方法，其特征在于，包括步骤：
(1)样品经过内标化处理，所述内标化处理包括8种同位素内标CA-d5，DCA-d5，LCA-d4，GLCA-d4，TCA-d4，TLCA-d5，TCDCA-d5，TUDCA-d5的内标液处理；
(2)进行色谱，其中色谱条件：色谱柱为Capcell Pak C18MG柱，流动相添加剂A为乙酸铵，流动相添加剂B为乙酸铵乙腈，梯度洗脱，
(3)进行质谱检测。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙酸铵浓度为10mM，pH＝9，所述乙酸铵乙腈浓度为10mM，pH＝9。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的温度为40℃。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的样品池温度为8℃，进样体积为5uL。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质谱检测的离子源参数为Curtain Gas(CUR)20、Collision Gas(CAD)8、ion spray voltage-4500V、source temperature 600℃、CUR 20.0、GS1 60.0和GS2 65.0。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品与内标液比例为100：500。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述样品为100ul，所述内标液为500ul，两者混匀，经37℃氮气吹干后，加入100u L复溶液(甲醇水溶液(1:1，v:v))复溶。
8.一种用于胆汁和血清中16种胆汁酸的定量检测方法的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括：
(1)内标：所述的内标包括8种同位素内标CA-d5，DCA-d5，LCA-d4，GLCA-d4，TCA-d4，TLCA-d5，TCDCA-d5，TUDCA-d5，优选为内标液；
(2)Capcell Pak C18MG柱；
(3)流动相添加剂，所述的流动相添加剂包括：乙酸铵、乙酸铵乙腈。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述的乙酸铵浓度为10mM，pH＝9。
10.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述乙酸铵乙腈浓度为10mM，pH＝9。
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