[发明专利]白藜芦醇的检测方法有效
申请号: | 201610576396.3 | 申请日: | 2016-07-21 |
公开(公告)号: | CN106290604B | 公开(公告)日: | 2017-05-03 |
发明(设计)人: | 林悦安;鄂芳;申铁 | 申请(专利权)人: | 林悦安;鄂芳;申铁 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 贵阳派腾阳光知识产权代理事务所(普通合伙)52110 | 代理人: | 管宝伟 |
地址: | 550081*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 藜芦 评价 自由基 代谢 方法 及其 检测 | ||
1.一种白藜芦醇的检测方法,其特征在于:该方法包括使用高效液相色谱法测定白藜芦醇供试品中白藜芦醇的含量,该方法包括如下操作:
(1)中国药典2015年版四部第59所第0512节所载的高效液相色谱法中的规范进行测定;
(2)色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-0.05%酒石酸水溶液以体积比30:70为流动相,检测波长为306nm;
取系统适用性试验溶液测定,理论板数按白藜芦醇峰计应不低于3000,白藜芦醇与其最接近的杂质峰之间的分离度应大于1.5,白藜芦醇与白藜芦醇苷峰之间的分离度应大于3.0;
(3)溶液制备:
取白藜芦醇供试品适量,加流动相溶解并稀释,制成每1ml溶液中含有白藜芦醇0.2mg的溶液,过滤,作为供试品溶液;
精密量取供试品溶液1ml置于100ml量瓶中,用流动相稀释刻度,摇匀,制成含白藜芦醇浓度为2μg/ml的溶液,作为对照溶液;
精密称取白藜芦醇对照品、白藜芦醇苷对照品适量,用流动相溶解并制成两种物质浓度均为分别为200μg/ml和2μg/ml的溶液,作为系统适用性试验溶液;
精密称取白藜芦醇对照品适量,用流动相溶解并制成每1ml溶液中含有白藜芦醇0.2mg的溶液,过滤,作为对照品溶液;
(4)测定:
精密量取对照溶液20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图,确定白藜芦醇主成分的保留时间,并读取白藜芦醇峰的峰面积;
精密量取系统适用性试验溶液20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图,计算理论板数和各峰之间的分离度;
精密量取对照品溶液20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图;
精密量取供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图至白藜芦醇苷保留时间的2倍,读取供试品溶液色谱图中主成峰峰面积和各杂质的峰面积;
(5)结果计算:
根据供试品溶液色谱图中主成分峰面积以及对照品溶液色谱图中主成分峰面积和对照品溶液主成分浓度,计算供试品中白藜芦醇的百分含量。
2.根据权利要求1所述的白藜芦醇的检测方法,其特征在于:还包括使用所述高效液相色谱法测定白藜芦醇供试品中杂质白藜芦醇苷的含量。
3.根据权利要求2所述的白藜芦醇的检测方法,其特征在于:根据记录的各色谱图,当供试品中检测到存在白藜芦醇苷时,以对照溶液色谱图中主成份峰面积为1.0%,计算供试品溶液色谱图中白藜芦醇苷相对于白藜芦醇的百分含量,即得到供试品中的白藜芦醇苷的含量。
4.根据权利要求1所述的白藜芦醇的检测方法,其特征在于:所述色谱柱的规格是:柱长15~30cm、柱内径4.6mm、填料粒径5μm。
5.根据权利要求1所述的白藜芦醇的检测方法,其特征在于:所述色谱柱的规格是:柱长20~30cm、柱内径4.6mm、填料粒径5μm。
6.根据权利要求1所述的白藜芦醇的检测方法,其特征在于:所述柱长25cm、柱内径4.6mm、填料粒径5μm。
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