[发明专利]一类新颖结构倍半萜化合物及其在制备抗炎药物中的应用

说明书

本发明公开了一类新颖结构倍半萜化合物及其在制备抗炎药物中的应用。倍半萜类化合物或其药用盐，其结构如式(Ⅰ)或(Ⅱ)所示。本发明的曲霉(Aspergillus sp.)SCSIO 05702能够产生具有抗炎活性的新颖倍半萜类化合物，该类化合物对LPS诱导小鼠巨噬细胞株RAW264.7释放NO具有较强的抑制作用，因此能够用于制备抗炎药物。本发明为制备具有抗炎活性的一类结构新颖的倍半萜类化合物的生产制备提供了一种新的方法，为开发高效、低毒的抗炎药物提供了理想的侯选化合物。

技术领域

本发明属于属于天然产物领域，具体涉及两个结构新颖的倍半萜类化合物及其在制备抗炎药物中的应用。

背景技术：

新颖结构天然产物的持续发现是药物研发的重要源泉之一。目前，从极端环境微生物，特别是从南极来源真菌中，获得骨架新颖的活性次生代谢产物已逐渐成为天然药物研究的重要方向之一。在对南极来源真菌的次生代谢产物的研究过程中，我们分离获得两个新颖骨架的倍半萜类化合物，它们具有很强的抗炎作用，且在有效剂量下，未发现有细胞毒性。因此是开发成为结构新颖、活性高效、低毒副作用的抗炎药物的理想侯选化合物。

发明内容：

本发明的第一个目的的是提供两个具有抗炎活性的新骨架倍半萜类化合物及其药用盐。

本发明的两个倍半萜类化合物或其药用盐，其结构如式(Ⅰ)和(Ⅱ)所示：

化合物1的结构如(Ⅰ)所示，化合物2的结构如式(Ⅱ)所示。

本发明的第二个目的是上述倍半萜类化合物的制备方法，所述的倍半萜类化合物是从曲霉(Aspergillus sp.)SCSIO 05702的发酵培养物中制备分离得到的。

优选，具体步骤如下：

a、制备曲霉(Aspergillus sp.)SCSIO 05702的发酵培养物；

b、将发酵培养物的发酵液和菌丝体分离，发酵液用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩后得到浸膏A；菌丝体先用丙酮浸提，合并浸提液，浸提液回收丙酮后剩余水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩后得到浸膏B，将浸膏A和浸膏B合并，得到粗提物；粗提物经中压正相硅胶柱层析，二氯甲烷/甲醇从100:0梯度洗脱至0:100，收集二氯甲烷/甲醇体积比为95:5洗脱的馏分；将该馏分进行葡聚糖凝胶Sephadex LH-20层析纯化处理，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1作为流动相洗脱，收集馏分再经纯化后得到如式(Ⅰ)和式(Ⅱ)所示的化合物。

所述的a步骤的制备曲霉(Aspergillus sp.)SCSIO 05702的发酵培养物优选通过以下方法制备：将活化的曲霉(Aspergillus sp.)SCSIO 05702接入种子培养基中，25℃，180rpm，培养72h制得种子液，将种子液以体积百分比5％的接种量接入到发酵培养基中，25℃，摇床培养35d，而制得发酵培养物，所述的种子培养基和发酵培养基的配方为每升培养基中含有：甘露醇20g、麦芽糖20g、葡萄糖10g、谷氨酸钠10g、KH₂PO₄ 0.5g、MgSO₄·7H₂O0.3g、酵母浸膏3g、玉米干粉0.3g、余量为水，pH 7.5。按上述组份和含量混合均匀，然后121℃，灭菌30min。

本发明的第三个目的是提供曲霉(Aspergillus sp.)SCSIO 05702在制备上述如式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示的倍半萜类化合物中的应用。

本发明通过实验发现，化合物1和2对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞株RAW264.7产生的一氧化氮具有较强的抑制作用，在浓度为25μM时，其抑制率分别为70.1％和67.1％，在相同浓度下，对RAW264.7细胞无细胞毒活性，因此可望开发成为无毒的抗炎新药。