[发明专利]盐酸厄洛替尼的关键起始原料三乙炔苯胺中潜在基因毒性杂质的分离与测定方法

权利要求书

1.利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼关键起始原料三乙炔苯胺及其潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈和二乙胺水溶液混合液为流动相进行梯度洗脱，所述二乙胺水溶液浓度为0.1％-0.3％,pH值为2.5-3.5；分离后采用紫外检测器对三乙炔苯胺及其潜在基因毒性杂质进行检测；所述潜在基因毒性杂质为M_2a、M_2b、M_2c、M_2d、M_2e、M_2f、M_2g所示化合物中的一种或多种；

所述梯度洗脱的条件为：

0min：乙腈与二乙胺水溶液的体积比为15-25：75-85；

20min：乙腈与二乙胺水溶液的体积比为35-45：55-65；

40min：乙腈与二乙胺水溶液的体积比为75-85：15-25；

45min：乙腈与二乙胺水溶液的体积比为75-85：15-25；

47min：乙腈与二乙胺水溶液的体积比为15-25：75-85；

55min：乙腈与二乙胺水溶液的体积比为15-25：75-85；

紫外检测波长为210nm±5nm时，检测出M_2a、M_2e、M_2g；紫外检测波长为230nm±5nm时，检测出M_2b、M_2d、M_2f、三苯基氧膦。

2.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼关键起始原料三乙炔苯胺及其潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于，所述的方法具体为：

取潜在基因毒性杂质对照品加稀释剂溶解制备成已知浓度的对照品溶液，取供试品加稀释剂溶解制备成供试品溶液，分别取对照品溶液及供试品溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，比较供试品溶液与对照品溶液中对应出峰时间的杂质的峰面积，计算供试品中所含三乙炔苯胺及潜在基因毒性杂质的含量；所述稀释剂为乙腈水溶液，其中乙腈与水的体积比为0.8-1.2：1。

3.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼关键起始原料三乙炔苯胺及其潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：分别取三乙炔苯胺及潜在基因毒性杂质对照品，分别用稀释剂溶解制成三乙炔苯胺定位溶液及各潜在基因毒性杂质的定位溶液，进行高效液相色谱分析，确定三乙炔苯胺及潜在基因毒性杂质的保留时间。