[发明专利]一种虎杖甙糖苷化的方法有效
申请号: | 201610596643.6 | 申请日: | 2016-07-27 |
公开(公告)号: | CN106282270B | 公开(公告)日: | 2020-06-16 |
发明(设计)人: | 陶军华;鞠鑫 | 申请(专利权)人: | 苏州汉酶生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P19/44 | 分类号: | C12P19/44;C12P19/18 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 孙仿卫;徐伟华 |
地址: | 215600 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 虎杖 糖苷 方法 | ||
1.一种虎杖甙糖苷化的方法,其特征在于,以虎杖甙为底物,在环糊精糖基转移酶和糖基供体的存在下,在pH为5~7、温度为40~70℃的水溶液中搅拌反应,HPLC检测反应进程至产品虎杖甙糖苷不再增加,结束反应,而后进行产品和底物分离的后处理操作,具体的,先除去反应液中多余的糖基供体,再采用萃取法或柱层析法将产品和底物进行分离;
对于所述的糖基供体为α-环糊精的反应液,采用萃取法进行产品和底物分离的后处理操作时,其具体过程如下:将大孔树脂Ⅰ通过浓度为95%的乙醇浸泡过夜后湿法装柱,而后用蒸馏水冲洗至无乙醇流出;将反应液过滤、浓缩后上样,采用蒸馏水冲洗至无糖基供体流出,之后再采用浓度为40%的乙醇冲洗至所有产品流出,最后合并产品样品,浓缩并采用等体积的乙酸乙酯进行多次萃取,收集水层、冻干得产品纯品;所述的大孔树脂Ⅰ为DM18大孔吸附树脂;
对于所述的糖基供体为玉米淀粉的反应液,采用柱层析法进行产品和底物分离的后处理操作时,其具体过程如下:在层析柱中装入大孔树脂Ⅱ并用无水乙醇浸泡过夜,依次采用三倍层析柱体积的无水乙醇和去离子水对所述大孔树脂Ⅱ进行冲洗,待用;将反应液进行离心处理,收集液体,并上样,上样后采用去离子水冲洗,最后采用浓度为30%的乙醇溶液进行洗脱,收集洗脱液,HPLC检测分析,合并底物含量小于1%的溶液,将溶剂置换成水,冻干得产品纯品;所述的大孔树脂Ⅱ为购自西安蓝晓科技新材料股份有限公司生产的型号为LXT-J420大孔吸附树脂。
2.根据权利要求1所述的虎杖甙糖苷化的方法,其特征在于,反应过程中,所述的环糊精糖基转移酶、糖基供体与虎杖甙的投料质量比为:0.5-1: 60-90:6。
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