[发明专利]检测毒死蜱的酶联免疫试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种检测毒死蜱的酶联免疫试剂盒，其特征在于包括：包被有毒死蜱偶联抗原的酶标板、毒死蜱单克隆抗体、酶标记抗抗体、毒死蜱标准品溶液、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液；所述毒死蜱单克隆抗体是以毒死蜱偶联抗原作为免疫原制备获得，所述毒死蜱偶联抗原是由毒死蜱半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为鼠血清蛋白、甲状腺蛋白、牛血清白蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或纤维蛋白原；所述毒死蜱半抗原是由毒死蜱原药在碱性条件下与氨基丁酸在吡啶环上与邻近氮原子的氯进行亲核取代反应得到，具体合成方法为：1.0g毒死蜱原药用30mL乙醇溶解，加氢氧化钠0.41g，加氨基丁酸0.35g，回流反应3h，检测，原料全部反应完成，蒸干乙醇，加水-乙酸乙酯萃取，水相，调节pH值到3，乙酸乙酯萃取，有机相蒸干，用二氯甲烷和正己烷重结晶，即得到毒死蜱半抗原产物，其分子结构式为：

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2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述抗抗体为羊抗鼠抗抗体。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述酶标记抗抗体的标记酶为辣根过氧化物酶，所述底物显色液由底物显色液A液和底物显色液B液组成，底物显色液A液为过氧化氢或过氧化脲，底物显色液B液为邻苯二胺或四甲基联苯胺，所述终止液为1~2mol/L的硫酸溶液。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述洗涤液为pH值为7.4，含有0.5%~1.0%吐温-20、0.01‰~0.03‰叠氮化钠的0.1~0.3mol/L磷酸盐缓冲液；所述复溶液为pH值为7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液。

5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述毒死蜱标准品溶液的浓度分别为0µg/L、0.6µg/L、1.8µg/L、5.4µg/L、16.2µg/L和48.6µg/L。

6.一种检测样品中毒死蜱含量的方法，包括步骤：

（1）样品前处理；

（2）用权利要求1~5任一项所述的试剂盒进行检测；

（3）分析检测结果。