[发明专利]一种NK细胞无血清培养基

权利要求书

1.一种应用于NK细胞的NK细胞无血清培养基，所述NK细胞无血清培养基包括基础培养基、适用于所述NK细胞无血清培养基的血清替代物、聚肌胞，所述血清替代物包含白蛋白、人转铁蛋白、胰岛素和胆固醇，其特征在于：

所述白蛋白是通过在无脂肪酸白蛋白上负载脂肪酸而形成的；

所述白蛋白是通过在无脂肪酸白蛋白上负载特定的脂肪酸而形成的；

所述特定的脂肪酸由棕榈酸和/或硬脂酸、油酸和亚油酸组成；按照每1mmol无脂肪酸白蛋白添加0.4-2mmol的棕榈酸和/或硬脂酸，0.4-2mmol的油酸和0.4-2mmol的亚油酸的比例，将所述特定的脂肪酸添加到所述无脂肪酸白蛋白的溶液中混合而形成；或者，

所述特定的脂肪酸由棕榈酸和/或硬脂酸、油酸、亚油酸和花生四烯酸组成，所述步骤二中，按照每1mmol无脂肪酸白蛋白添加0.4-2mmol的棕榈酸和/或硬脂酸，0.4-2mmol的油酸和0.4-2mmol的亚油酸的比例，所述花生四烯酸与所述亚油酸的添加量的比值为1:6～1:1，将所述特定的脂肪酸添加到所述无脂肪酸白蛋白的溶液中混合而形成。

2.如权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于：所述特定的脂肪酸由棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸组成，所述硬脂酸与所述棕榈酸的添加量的比值为1:6～1:1。

3.如权利要求1所述的NK细胞无血清培养基，其特征在于：所述NK细胞无血清培养基，所述白蛋白的添加量为0.015～0.15mmol/L，以基础培养基的体积为基准。

4.如权利要求1-3中任意一项所述的NK细胞无血清培养基，其特征在于：所述的白蛋白为牛血清白蛋白、人血白蛋白或重组人血白蛋白。

5.如权利要求4所述的NK细胞无血清培养基，其特征在于：所述的重组白蛋白为水稻胚乳表达的重组人血白蛋白或者转基因酵母菌表达的重组人血白蛋白。

6.如权利要求1-5中任意一项所述的NK细胞无血清培养基，其特征在于：所述的聚肌胞浓度为0.1-1000μg/ml。

7.如权利要求1-6中任意一项所述的NK细胞无血清培养基，其特征在于：所述的基础培养基为IMDM培养基，以基础培养基的体积为基准，所述人转铁蛋白的添加量为1～100mg/L，所述胰岛素的添加量为1～100mg/L，所述胆固醇的添加量为1～10mg/L。

8.如权利要求7所述的NK细胞无血清培养基，其特征在于：所述血清替代物还包含乙醇胺，其添加量为1～10mg/L，以基础培养基的体积为基准。

9.如权利要求1-3中任意一项所述的NK细胞无血清培养基，其特征在于：所述NK细胞无血清培养基的pH值为6.8～7.5。

10.如权利要求1-9中任意一项所述的配制方法所配制的NK细胞无血清培养基，或者，如权利要求1-9中任意一项所述的NK细胞无血清培养基，在培养NK细胞方面的应用。