[发明专利]一种纯化妥布霉素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及化合物的纯化方法，具体涉及妥布霉素的纯化方法。

背景技术

妥布霉素化学名称：O-3-氨基-3-脱氧-α-O-葡吡喃糖基-(1→6)-O-[2，6-二氨基-2，3，6-三脱氧-α-D-核-己吡喃糖基-(1→4)]-2-脱氧-D-链霉胺；分子式为：C₁₈H₃₇N₅O₉，分子量为：467.52，化学结构式为：

妥布霉素是美国礼来(LILLY)公司在1967年从黑暗链霉素(s.tenebrarius)发酵液中分离的得到的，是世界临床广泛使用的氨基糖苷类抗生素之一。临床主要用于敏感细菌引起的严重感染，如革兰阴性菌特别是绿脓杆菌、大肠杆菌及肺炎杆菌等引起的烧伤感染、败血症、呼吸系统感染、泌尿系统感染、胆囊胆道感染及软组织严重感染等。

《中国医药工业杂志》(Chinese Journal of Pharmaceuticals2003.34(1))中《妥布霉素结晶工艺的改进》，文章讨论了乙醇加量与发酵液体积比与收率的关系，添加晶种与产品效价的关系，以及结晶时搅拌、结晶分离时洗涤与产品效价之间的关系。

《山东医药工业》2002年第二十一卷第2期《妥布霉素结晶工艺的研究》尝试了用甲醇、乙醇、丁二醇、丙酮作为溶析剂，对妥布霉素进行结晶，讨论了直接、搅拌、静置、共沸和加入晶种结晶的结晶方法，对产品质量、收率的影响。

现有技术对于妥布霉素结晶工艺的探讨，得出经过滴加乙醇、温度变化、加晶种、控制搅拌速度的传统结晶方法，使产品纯度和收率提高，另外还提及了高纯度结晶液条件下的共沸结晶。

发明内容

本发明的目的是提供一种纯化妥布霉素的方法。本发明通过大量的结晶工艺实验研究惊奇地发现，在结晶过程中添加(S)-(+)-乳酸盐，能增加溶剂环境对妥布霉素粗品中杂质的溶解度，获得高纯度、易分离的晶体，提高产品质量。

本发明所述妥布霉素粗品，是由黑暗链霉素发酵液中提取出来的卡拉霉素B经水解后获得。上述妥布霉素粗品的制备方法为本领域公知的成熟技术方案，本发明不做特殊限定。

具体而言，本发明提供了一种纯化妥布霉素的方法，所述方法包括以下步骤：将妥布霉素粗品溶解在水中，加热条件下滴加(S)-(+)-乳酸盐的低级醇溶液，降温结晶，分离结晶后洗涤、干燥，即得。

其中，所述(S)-(+)-乳酸盐选自(S)-(+)-乳酸铵、(S)-(+)-乳酸钠、(S)-(+)-乳酸钾、(S)-(+)-乳酸锂中的一种或多种；优选为(S)-(+)-乳酸钠。

所述低级醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种；优选为乙醇。

作为本发明的优选方案，所述(S)-(+)-乳酸盐的低级醇溶液浓度为0.5～10g/100ml，优选为1～5g/100ml，更优选为2～5g/100ml。

为了提高所述杂质的去除效果，且避免对最终产品的收率造成不利影响，本发明优选所述妥布霉素粗品与(S)-(+)-乳酸盐的重量比为1：0.1～20，优选为1：0.4～5。

在溶解妥布霉素粗品时，每1g妥布霉素粗品用1.8～25ml水溶解，优选用3～18ml水溶解，更优选用5～10ml水溶解。

为了提高结晶效果，确保所得产物具有良好的收率以及纯度，本发明对加热温度以及降温终点温度进行优选。具体而言，所述加热条件为55～85℃

水浴加热，优选为65℃水浴加热；所述降温具体为：缓慢降温至-15℃20℃，优选为0～15℃。

作为本发明的一种优选实施方案，所述方法包括以下步骤：将妥布霉素粗品以1g/8～10ml溶于水，60～70℃热水浴条件下滴加800～880ml浓度为2～5g/100ml的(S)-(+)-乳酸钠乙醇溶液，静置，缓慢冷却至10℃，抽滤收集晶体，用乙醇洗涤晶体，真空干燥，即得。

本发明提供的方法创造性地提出利用(S)-(+)-乳酸盐的低级醇溶液改变杂质的溶解性，从而提高妥布霉素的收率和产品质量。该方法工艺简单，操作简便，所得产物收率高，纯度可达99％以上，具有很强的推广和实用价值。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

以下各实施例中，妥布霉素粗品按照常规方法制备而成，具体为：取发酵液，经732树脂吸附、分离后氨水解吸，浓缩，水解，上151柱，解吸，脱色，一次结晶，分离，干燥，即得。经常规HPLC法检测，所述粗品中妥布霉素的含量为89.86％。