[发明专利]5‑氯‑8‑羟基‑喹啉及其衍生物在磷酸化蛋白质荧光检测中的应用

权利要求书

1.5-氯-8-羟基-喹啉及其衍生物在磷酸化蛋白质检测中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的5-氯-8-羟基-喹啉及其衍生物为5-氯-8-羟基-喹啉的钠盐、钾盐或铵盐。

3.一种磷酸化蛋白质检测方法，其包括步骤：

1)将经SDS-PAGE电泳后的蛋白质样品凝胶置于50％甲醇和10％乙酸的固定液中固定2次，每次10～30min；

2)弃固定液，加入按摩尔浓度比5～100μM的铝离子，按溶液体积比5～20％的乙醇溶液漂洗2～10min；

3)弃铝离子溶液，加入按溶液体积比10～30％的甲醇溶液漂洗5～20min；

4)弃去甲醇溶液，加入荧光染色液10～30min，其中所述染色液为含按摩尔浓度比50～100μM的5-氯-8-羟基-喹啉，按摩尔浓度比2～10mM的乙酸钠-乙酸缓冲液(pH＝5.5)，按溶液体积比20～40％的乙醇溶液；

5)检测。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤1)中每次固定时间为15min。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)中铝离子浓度的浓度按摩尔浓度比为50μM，乙醇的浓度按溶液体积比为10％，漂洗时间为5min。

6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤3)甲醇溶液中甲醇的浓度按溶液体积比为20％，漂洗时间为15min。

7.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤4)染色液中5-氯-8-羟基-喹啉的浓度按摩尔浓度比为62.5μM，乙酸钠-乙酸的浓度按摩尔浓度比为5mM，乙醇的浓度按溶液体积比为30％，染色时间为20min。