[发明专利]一种确定芪白平肺颗粒指纹图谱的方法及其指纹图谱

权利要求书

1.一种确定芪白平肺颗粒指纹图谱的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤，

步骤1：用甲醇溶液分别对芪白平肺颗粒样品和五味子醇甲进行提取，得到样品溶液和参照物溶液；

步骤2：对样品溶液和参照物溶液进行高效液相色谱分析；分别精密吸取样品溶液与参照物溶液各10μl，注入液相色谱仪测定，记录100min指纹图谱；

高效液相色谱条件如下：

色谱柱：选自规格为4.6×250mm、5μm的Waters XBridge C18，规格为4.6×250mm、5μm的Phenomenex Luna C18和规格为4.6×250mm、5μm的Kromasil C18中的任一种；

以甲醇为流动相A，以0.2％甲酸为流动相B，按如下条件进行梯度洗脱：时间0～100分钟，流动相A(％)5→95，流动相B(％)95→5；

理论板数按五味子醇甲峰计算不低于6000；

流速为0.8ml/min～1.2ml/min；

柱温为25℃～35℃；

检测波长为250nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

在步骤1中，样品溶液制备具体过程：将芪白平肺颗粒研细，取本品适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50％甲醇超声提取或回流提取30min，放冷，摇匀，离心，取上清液，即得；

参照物溶液制备具体过程：精密称定五味子醇甲，加50％甲醇制成五味子醇甲溶液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤一选择用超声提取，提取溶剂体积为芪白平肺颗粒取样量12.5倍的50％甲醇；所述五味子醇甲溶液浓度为95.61μg·mL^-1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱条件中，流速选为1.0ml/min，柱温选为30℃。

5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，得到的所述指纹图谱包括1-25号峰，其中，12号峰为咖啡酸，13号峰为阿魏酸，22号峰为五味子醇甲作为参照峰，23号峰为五味子酯甲，24号峰为五味子甲素，25号峰为五味子乙素，其相对保留时间分别为0.355～0.44、0.49～0.60、1.00、1.05～1.3、1.12～1.4、1.15～1.48。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述咖啡酸、阿魏酸、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的相对峰面积分别为3.293～4.025、1.977～2.416、1.00、0.343～0.419、0.870～1.064、0.367～0.449。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在所述指纹图谱中，1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰、7号峰、8号峰、9号峰、10号峰、11号峰、14号峰、15号峰、16号峰、17号峰、18号峰、19号峰、20号峰、21号峰，其相对保留时间分别为0.065～0.085、0.075～0.100、0.085～0.11、0.10～0.125、0.105～0.135、0.145～0.185、0.115～0.245、0.205～0.255、0.220～0.275、0.268～0.335、0.325～0.40、0.495～0.610、0.565～0.695、0.595～0.735、0.615～0.755、0.640～0.785、0.715～0.88、0.735～0.905、0.85～1.05。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰、7号峰、8号峰、9号峰、10号峰、11号峰、14号峰、15号峰、16号峰、17号峰、18号峰、19号峰、20号峰、21号峰，其相对峰面积分别为0.339～0.414、1.028～1.256、1.522～1.860、2.141～2.617、3.462～4.231、0.784～0.958、0.558～0.682、0.511～0.625、0.339～0.415、0.862～1.054、0.831～1.016、1.514～1.851、0.242～0.295、0.696～0.850、0.647～0.790、0.453～0.554、0.925～1.131、0.207～0.253、0.628～0.767。