[发明专利]结直肠癌microRNA分子标志物及其用途

权利要求书

1.一种结直肠癌microRNA分子标志物组合，其由以下的microRNA核酸分子构成：序列为SEQ ID NO:1的miR-21-3p、序列为SEQ ID NO:2的miR-877-5p、序列为SEQ ID NO:3的miR-181d、序列为SEQ ID NO:4的miR-202-3p、序列为SEQ ID NO:5的miR-19b-3p 、序列为SEQ ID NO:6的miR-380-5p 、序列为SEQ ID NO:7的miR-1246、序列为SEQ ID NO:8的miR-627、序列为SEQ ID NO:9的miR-451a、序列为SEQ ID NO:10的miR-339-5p、序列为SEQ IDNO:11的miR-520e、序列为SEQ ID NO:12的miR-21-5p和序列为SEQ ID NO:13的miR-532-3p。

2.权利要求1所述的结直肠癌microRNA分子标志物组合在制备结直肠癌诊断试剂中的用途。

3.权利要求2所述的用途，其中，所述诊断试剂通过检测被试者血浆或血清中所述的结直肠癌microRNA分子标志物的含量，并与结直肠息肉患者或健康对照平均水平相比较来判断是否发生结直肠癌。

4.权利要求2或3所述的用途，其中，使用定量PCR的方法来检测被试者血浆或血清中所述的结直肠癌microRNA分子标志物含量。

5.一种结直肠癌诊断和疗效及预后评估试剂盒，其特征在于：包括引物，所述引物为权利要求1所述的结直肠癌microRNA分子标志物组合的特异性正向引物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于所述的特异性正向引物由以下序列的引物构成：序列为SEQ ID NO:19的miR-21-3p的引物、序列为SEQ ID NO:20的miR-877-5p的引物、序列为SEQ ID NO:21的miR-181d的引物、序列为SEQ ID NO:22的miR-202-3p的引物、序列为SEQ ID NO:23的miR-19b-3p的引物、序列为SEQ ID NO:24的miR-380-5p的引物、序列为SEQ ID NO:25的miR-1246的引物、序列为SEQ ID NO:26的miR-627的引物、序列为SEQ IDNO:27的miR-451a的引物、序列为SEQ ID NO:28的miR-339-5p的引物、序列为SEQ ID NO:29的miR-520e的引物、序列为SEQ ID NO:30的miR-21-5p的引物和序列为SEQ ID NO:31的miR-532-3p的引物。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其还进一步包括：

（1）血浆/血清总RNA提取试剂，

（2）RNA加polyA试剂，

（3）RT-PCR试剂，

（4）定量PCR试剂，

其中，定量PCR试剂中包括权利要求6中所述的结直肠癌microRNA分子标志物组合的特异性正向引物。

8.权利要求7所述的试剂盒，其中，所述血浆/血清总RNA提取试剂中包括序列为SEQ IDNO:14的外部控制序列-1，其中，所述RNA加polyA试剂中包括序列为SEQ ID NO:15的外部控制序列-2，其中，所述RT-PCR试剂中包括序列为SEQ ID NO:16的反转录引物。

9.权利要求7所述的试剂盒，其中，所述定量PCR试剂中包括序列分别为SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18的通用反向引物UPM-short和UPM-long。