[发明专利]一种芪苓健肾片指纹图谱的检测方法

权利要求书

1.一种芪苓健肾片指纹图谱的检测方法，其特征在于，该方法采用以下方法建立芪苓健肾片的标准指纹图谱，采用高效液相色谱法，色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱：Waters Symmetry C₁₈，250 mm×4.6mm，5μm；以乙腈为流动相A，以体积浓度0.5%磷酸水为流动相B，梯度洗脱0~65min；流速每分钟为1.0ml；检测波长为208nm；柱温30℃；理论板数按青藤碱峰计算应不低于100000；所述梯度洗脱程序为：

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2.根根据权利要求1所述的一种芪苓健肾片指纹图谱的检测方法，其特征在于：建立芪苓健肾片的标准指纹图谱后，按相同的方法测定待测芪苓健肾片样品的指纹图谱，然后将其与上述芪苓健肾片的标准指纹图谱比较，相似度不低于0.80。

3.根据权利要求2所述的一种芪苓健肾片指纹图谱的检测方法，其特征在于： 供试品溶液的制备：取芪苓健肾片装量差异项下的内容物适量，混匀，研细，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为30~70%甲醇15~75mL，称定重量；超声处理15~60min，放冷，再称定重量，用体积浓度为30~70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，续滤液用微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品、青藤碱对照品、淫羊藿苷对照品适量，用甲醇配制成含绿原酸、淫羊藿苷、青藤碱的混合溶液，作为对照品溶液；

测定：精密吸取所述的供试品溶液和对照品溶液各5~15µL，分别注入高效液相色谱仪中进行检测，记录65min图谱；以对照品色谱峰为参照，根据中药色谱指纹图谱软件对所得数据和谱图进行处理，得到芪苓健肾片指纹图谱。

4.根据权利要求3所述的一种芪苓健肾片指纹图谱的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，其步骤如下：

（1）供试品溶液的制备：取芪苓健肾片装量差异项下的内容物0.35g，混匀，研细，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为50%甲醇50mL，称定重量；超声处理30min，放冷，再称定重量，用体积浓度为50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液过0.22μm滤膜，滤液作为供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品、青藤碱对照品、淫羊藿苷对照品适量，用甲醇配制成每1mL含绿原酸40μg、淫羊藿苷40μg、青藤碱320μg的混合溶液，作为对照品溶液；

（3）测定：精密吸取所述的供试品溶液和对照品溶液各10µL，分别注入高效液相色谱仪中进行检测，记录65min图谱；以对照品色谱峰为参照，根据中药色谱指纹图谱软件对所得数据和谱图进行处理，得到芪苓健肾片指纹图谱。

5.根据权利要求4所述的一种芪苓健肾片指纹图谱的检测方法，其特征在于：所述的超声处理的功率为250W，频率为40kHz。